產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
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貨號(hào) | YS-01X7387 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價(jià) | ¥1-¥580 | /件 |
更新時(shí)間:2025-05-13 14:57:22瀏覽次數(shù):41
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
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貨號(hào) | YS-01X7387 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
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細(xì)胞屬性:
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠角膜上皮原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 眼角膜組織 |
英文名稱 | Rat Corneal Epithelial Cells | 貨號(hào) | YS-01X7387 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠角膜上皮細(xì)胞分離自眼角膜組織,;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,,從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,,中央部最薄,。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,,眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛,。為了保持透明,角膜并沒(méi)有血管,,透過(guò)外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層,、前彈力層、基質(zhì)層,、后彈力層,、內(nèi)皮細(xì)胞層。其主要功能如下:①角膜是的無(wú)血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,,分三層細(xì)胞層,,外層即是上皮細(xì)胞;②角膜上皮細(xì)胞能參與先天性免疫,,能感應(yīng)病原體存在并發(fā)出信號(hào)從而激活角膜防御系統(tǒng),;③角膜上皮細(xì)胞能高效表達(dá)醛脫氫酶。角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)研究角膜的生理學(xué),、病理學(xué),、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段,常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物,、病毒感染,、各種生長(zhǎng)因子和藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
操作步驟:
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),,PBS沖洗3次,,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán),。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品:
豚鼠白介素2(IL-2)試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit
Human ubiquitin decomposition enzyme (DUB) ELISA Kit 人泛素分解酶(DUB)試劑盒
RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit 兔子白介素3(IL-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta-DFELISAKit大鼠β-防御素
細(xì)菌樣品二維電泳裂解液用于細(xì)菌蛋白二維電泳
RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠細(xì)胞色素氧化酶(CC0)試劑盒 96T/48T
Human lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒
Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenImmunoglobulinE,IgE試劑盒雞免疫球蛋白E(IgE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit ELISA.
大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISAKit ELISA.
大鼠(AZT)ELISAKit ELISA.
FLT3重組小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 Protein
紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)重組蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR)
CRABP1重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein
CDK5 Protein Human 重組人 CDK5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL17A Protein Canine 重組狗 IL17 / IL17A 蛋白
CD86 Others Human 人 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 CC Others Human 人 CC / chymoypsin C 人細(xì)胞裂解液 FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人細(xì)胞裂解液 人胚胎氣管組織來(lái)源細(xì)胞 小鼠原代胰腺腺泡上皮細(xì)胞 大鼠原代乳腺上皮細(xì)胞
大鼠角膜上皮原代細(xì)胞趨化因子C-C-基元配體14(CCL14)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 14 (CCL14)
AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein
HA Protein H4N4 重組甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD1D & B2M重組人 CD1D & B2M Heterodimer 蛋白 Protein