大鼠角膜基質(zhì)原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：雞原代腎小管上皮細(xì)胞 J82(人膀胱癌細(xì)胞) A498 人癌細(xì)胞 1ml/T75 MSTO-211H 人肺癌細(xì)胞株 U251 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 小鼠原代骨髓單核細(xì)胞

大鼠角膜基質(zhì)原代細(xì)胞

大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜,，約占纖維膜的前1/6,，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,，如有外物接觸角膜,，眼瞼便會不由自主地合上以保護(hù)眼睛,。為了保持透明，角膜并沒有血管,，透過外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層,、前彈力層、基質(zhì)層,、后彈力層,、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,，占據(jù)角膜厚度的90%,，由角膜基質(zhì)細(xì)胞、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成,。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成,。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整，透明度高的特點(diǎn),，正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分,，維持角膜的透明度，此細(xì)胞對于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義,。角膜基質(zhì)細(xì)胞,，存在于角膜基質(zhì)層中，在正常情況下,，處于靜止?fàn)顟B(tài),。但當(dāng)角膜損傷時(shí)，不同上皮來源的因子及環(huán)境信號,，將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng),，決定著角膜能否被修復(fù)。

產(chǎn)品名稱：大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞

組織來源：眼角膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜基質(zhì)采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

豚鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒

Rat angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 大鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒

HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISAKit 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumancyclophilinA,CyPA試劑盒人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒

組織GSK3激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)試劑盒

豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 ，英文名： iFABP ELISA Kit

Human multidrug resistance associated protein (MRP) ELISA Kit 人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)試劑盒

rabbitsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBetaGD(HumanBeta-glucuronidase)ELISAKit人β葡萄糖酸苷酶

細(xì)菌腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit兔子肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人中期因子(MK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

PTPN11重組小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein

泛素(Ub)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)

PRKAR1A重組人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白

CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人細(xì)胞裂解液   FD4細(xì)胞,，人淋巴細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞 小鼠畸胎瘤細(xì)胞,F9細(xì)胞 CM-H095人骨骼肌細(xì)胞CM-R014大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞100mL 小鼠原代胰腺星狀細(xì)胞 人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞

大鼠角膜基質(zhì)原代細(xì)胞Morphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 10mgMorphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白

CXCL13重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 Protein

PREP Protein Mouse 重組小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白

DAPK3重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。