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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠膠質(zhì)瘤組織源經(jīng)檢測,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠膠質(zhì)瘤組織源原代細胞 | 組織來源 | 膠質(zhì)瘤 |
英文名稱 | Rat Glioma Tissue-Derived Cells | 貨號 | YS-01X8236 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠膠質(zhì)瘤組織源細胞分離自癌組織,；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中最常見的一類,。相對應的,，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名,，如腎母細胞瘤,、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習慣上泛指所有惡性腫瘤,。癌癥具有細胞分化和增殖異常,、生長失去控制、浸潤性和轉(zhuǎn)移性等生物學特征,，其發(fā)生是一個多因子,、多步驟的復雜過程，分為致癌,、促癌,、演進三個過程，與吸煙,、感染,、職業(yè)暴露、環(huán)境污染,、不合理膳食,、遺傳因素密切相關(guān)。癌細胞,，是一種變異的細胞,，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同,，有無限增殖,、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點，能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織,。癌細胞除了分裂失控外（能進行多極分裂）,，還會局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種,。
培養(yǎng)信息：
包被條件：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
大鼠膠質(zhì)瘤組織源細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 試劑盒
Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒
humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)試劑盒 進口分裝
HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7試劑盒人周期素依賴性激酶7(CDK-7)試劑盒
組織GSK3α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMNElastase)試劑盒
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human surface membrane immunoglobulin (SmIg) ELISA Kit 人細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)試劑盒
HumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCyclin-dependekinase2,CDK-2試劑盒人周期素依賴性激酶2(CDK-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織GRK4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanprealbumin,，PAELISAKit人前白蛋白(PA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat angiotensin I (Ang- I) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒
Humanai-doublesandedDNA,dsDNAELISAKIT 人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCyclin-dependekinase1,CDK-1試劑盒人周期素依賴性激酶1(CDK-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織GRK4α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPrednisolone,PSELISAKit人龍(PS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
CD24重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 Protein
凋亡相關(guān)因子配體(FASL)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
NAPG重組人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 標簽) Protein
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽)
IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標簽)
CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細胞裂解液 BALL-1人B淋巴細胞急性白血病細胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內(nèi)含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清 CM-R070 小鼠原代陰道真皮成纖維細胞 大鼠原代主動脈平滑肌細胞
大鼠膠質(zhì)瘤組織源原代細胞ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mgChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰受體M2(抗原)
AK2 Protein Human 重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標簽)
THPO重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽) Protein
FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標簽)
ELK1重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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