大鼠脊髓微血管內(nèi)皮原代細胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代支氣管上皮細胞 HSC-T6(大鼠肝星形細胞) NCI-H1299 人非小細胞肺癌細胞 1ml/T75 ME-180 人頸表皮癌細胞 MNNG/HOS Cl #5[R-1059-D] 人骨肉瘤細胞 小鼠原代關(guān)節(jié)軟骨細胞

大鼠脊髓微血管內(nèi)皮原代細胞

大鼠脊髓微血管內(nèi)皮細胞分離自脊髓組織,；脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分,。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息,。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,，在椎管里面,，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),，分布到四肢,、體壁和內(nèi)臟,。脊髓的內(nèi)部有一個H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū),，主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),，主要由有髓神經(jīng)纖維組成,；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)（稱為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚,、肌肉和內(nèi)臟器官,。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的最微細的血管,。介于微動脈和微靜脈之間,。平均直徑7～9微米，數(shù)量極多,，成網(wǎng)狀分布,。管壁由一層內(nèi)皮細胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米,?；ね饷嬗斜咏Y(jié)締組織，其中有纖維細胞,、巨噬細胞和周細胞等,。最細的毛細血管由一個內(nèi)皮細胞圍成管腔，較粗的毛細血管由2～3個內(nèi)皮細胞圍成,。分布于肌肉組織,、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的毛細血管,，內(nèi)皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續(xù)毛細血管,；分布于內(nèi)分泌腺,、腎臟等處的毛細血管，除有縫隙連接外,，細胞本身有許多小孔,，（孔徑800～1000埃），稱有孔毛細血管,；分布于肝,、脾、骨髓及某些內(nèi)分泌腺的毛細血管,，管腔擴大,，稱血竇。毛細血管的管壁薄,、通透性大,、管徑細（8～10微米）、數(shù)量多,、血流速度慢,，這些特點使其成為血液與組織液進行物質(zhì)交換的場所，又稱交換血管,。血竇（sinusoid）由毛細血管管腔擴大而成,，竇壁的一般結(jié)構(gòu)與毛細血管壁相同，由單層內(nèi)皮細胞構(gòu)成,，內(nèi)皮細胞膜上有窗孔,。不同器官的竇壁結(jié)構(gòu)各有差別。脾血竇的內(nèi)皮細胞間有較寬裂隙,；肝血竇內(nèi)皮細胞是不連續(xù)的,，有較寬的細胞隙（0.1～0.5微米）；肝,、脾血竇的基膜不完整或無基膜,，通透性比毛細血管大，較大的蛋白質(zhì)和血細胞可以通過,。肝血竇壁內(nèi)有枯否細胞,，脾血竇內(nèi)外有巨噬細胞,，這兩種細胞都有吞噬能力,，可吞噬清除血液中的異物、細菌等有害物質(zhì),，是機體單核巨噬細胞系統(tǒng)的重要組成分,。某些內(nèi)分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜,。

產(chǎn)品名稱：大鼠脊髓微血管內(nèi)皮細胞

組織來源：脊髓

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS,、EGF,、bFGF、IGF,、VEGF,、Heparin、Hydrocortisone,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

大鼠脊髓微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

方法簡介

實驗室分離的大鼠脊髓微血管內(nèi)皮采用蛋白酶 - 膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的大鼠脊髓微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。

3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA 試劑盒

Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)試劑盒

Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)試劑盒 進口分裝

HumanCXC-chemokinereceptor1,CXCR1試劑盒人CXC趨化因子受體1(CXCR1)試劑盒

組織ERK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanprocollagenⅢN-terminalpeptide,，PⅢELISAKit人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒

小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat anaphylatoxin / compleme fragme 4a (C4a) ELISA Kit 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)試劑盒

HumanactivatedproteinC,APCELISAKit 人活化蛋白C(APC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickenniicoxide,NO試劑盒雞(NO)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞P35蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFollistatin,FSELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒

Human ai SS-A/Ro aibody ELISA Kit 人抗SS-A/Ro抗體試劑盒

PorcineIerleukin1β,IL-1βELISAKit 豬白介素1β(IL-1β)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAIFELISAKit大鼠凋亡誘導因子

血液牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定量PCR擴增試劑盒20次

MouseTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISAKit小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TGSF)試劑盒

NA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標簽) Protein

PS-1(NT 0.5mgPS-1(NT)，Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原)

IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (His 標簽) Protein

AKR1C4 Protein Human 重組人 AKR1C4 蛋白 (His 標簽)

EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白

CD3D & CD3E Others Mouse 小鼠 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液   HAVCR1 Others Canine 狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液   CM-M088小鼠破骨細胞原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞培養(yǎng)特制添加劑 小鼠原代脂肪微血管內(nèi)皮細胞 小鼠原代腎周細胞

大鼠脊髓微血管內(nèi)皮原代細胞抑制素βE(INHβE)重組蛋白 Recombinant Inhibin Beta E (INHbE)

IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白 (His & Fc 標簽)

IL1RAPL1重組人 IL-1R8 / IL1RAPL1 蛋白 Protein

GFP Protein Aequorea victoria 重組水母 GFP 蛋白

HA重組甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。