大鼠脊髓成纖維原代細胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代胰腺導管上皮細胞 HL-7702(人肝正常細胞) NCI-H23 人非小細胞肺癌細胞 1ml/T75 MDA-MB-435 人癌高轉(zhuǎn)移細胞 HeLa 人細胞 小鼠原代滑膜間充質(zhì)干細胞

大鼠脊髓成纖維原代細胞

大鼠脊髓成纖維細胞分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護,；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息,。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息,。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面,，上端連接延髓,，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng)，分布到四肢,、體壁和內(nèi)臟,。脊髓的內(nèi)部有一個H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成,；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞,。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)（稱為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚,、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,，也是許多簡單反射活動的低級中樞,。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié)，31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來；成纖維細胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的脊髓成纖維細胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長,，不聚集成團,；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長，平坦,、胞體較大,，細胞質(zhì)透明，細胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。脊髓成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),；合成和釋放細胞外基質(zhì),；組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

產(chǎn)品名稱：大鼠脊髓成纖維細胞

組織來源：脊髓組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠脊髓成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠脊髓成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。

3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

小鼠(HYD)ELISA 試劑盒

Human urinary free coisol (UFC) ELISA Kit 人尿游離(UFC)試劑盒

HumanMyosinlightChain,MLCELISAKit 人肌球蛋白輕鏈(MLC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgG試劑盒豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級綠色熒光測定試劑盒50次

Mousebonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit小鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白介素13(IL-13)試劑盒 ,，英文名： IL-13 ELISA Kit

Human aryl hydrocarbon receptor (AhR) ELISA Kit 人芳香烴受體(AhR)試劑盒

rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 兔子白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(MouseBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M

細菌異化型鹽還原酶活性比色法定量試劑盒20次

rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

SCGB1A1重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 Protein

Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白 Recombinant Enah/Vasp Like Protein (EVL)

MAG重組人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液   293(人胚細胞)     肺成纖維細胞Many   中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF  人羊膜細胞 小鼠原代主動脈瓣膜間質(zhì)細胞 兔原代胎盤間充質(zhì)干細胞

大鼠脊髓成纖維原代細胞CD146/MCAM 黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗原 0.5mgCD146/MCAM 黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗原

ALDH3A1 Protein Human 重組人 ALDH3A1 蛋白 (His 標簽)

CLEC14A重組小鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (His 標簽) Protein

EPHA3 Protein Rat 重組大鼠 EphA3 蛋白 (His 標簽)

PHOSPHO1重組人 PHOSPHO1 蛋白 (His 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。