詳細(xì)介紹
大鼠滑膜原代細(xì)胞
大鼠滑膜細(xì)胞分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu),,各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會累及滑膜,。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),同時在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位,。骨關(guān)節(jié)炎(OA)以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣鳎洳±砀淖兝奂瓣P(guān)節(jié)的各個組成部分,,但絕不僅局限于軟骨,,還包括軟骨下骨、滑膜,、半月板和韌帶,。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,,共同加速關(guān)節(jié)的退變,。滑膜細(xì)胞是構(gòu)成滑膜層的最大細(xì)胞群體,,是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),,它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中,基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布,?;び?span>A型(巨噬樣滑膜細(xì)胞)、B型(成纖維樣滑膜細(xì)胞)以及C型(樹突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞)細(xì)胞組成,?;ぜ?xì)胞主要功能:①滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤滑液成分,并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān),;②滑膜細(xì)胞增生,,表現(xiàn)為不依賴于支持物生長,并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞;③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分,。
英文名稱 | Rat Synovial Cells | 組織來源 | 滑膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7295 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠滑膜細(xì)胞
組織來源:滑膜組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠滑膜采用混合酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠滑膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠D(VD)ELISA 試劑盒
Rat bone morphogenetic protein (BMPs) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒
HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)試劑盒 進(jìn)口分裝
ChickenLaminin,LN試劑盒雞層連蛋白/板層素(LN)試劑盒
載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒
小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human thioredoxin (x) ELISA Kit 人硫氧化還原蛋白(x)試劑盒
Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISAKit 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickeumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3試劑盒雞壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞AIL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEsadiolreceptor,ERELISAKit小鼠雌二醇受體(ER)試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
堿性蛋白酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
HA重組甲型流感 H5N1 (A/duck/Laos/3295/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11) ??窠?jīng)毒素(35肽)
SERPINF1重組人 SerpinF1 / PEDF 蛋白 Protein
IL5 Protein Human 重組人 IL5 / Interleukin 5 蛋白
LXN Protein Human 重組人 Latexin / LXN / TCI 蛋白
CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標(biāo)簽) 雙位點HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T HeLa 229人細(xì)胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO) 小鼠原代主動脈平滑肌細(xì)胞 人原代少突膠質(zhì)細(xì)胞
大鼠滑膜原代細(xì)胞Integrin alpha 1 整合素α1抗原 0.5mgIntegrin alpha 1 整合素α1抗原
AMIGO2 Protein Human 重組人 AMIGO2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ART4重組食蟹猴 ART4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
LAIR1 Protein Mouse 重組小鼠 LAIR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PIN1重組人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。