大鼠骺軟骨原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代胸腺上皮細(xì)胞 Hela(人細(xì)胞) SK-N-MC 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 1ml/T75 LS174T 人結(jié)腸癌細(xì)胞 HuH-7 人肝癌細(xì)胞 小鼠原代口腔粘膜成纖維細(xì)胞

大鼠骺軟骨原代細(xì)胞

大鼠骺軟骨細(xì)胞分離自骨骺生長(zhǎng)板,；骨骺生長(zhǎng)板位于長(zhǎng)骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織，其中的骺軟骨細(xì)胞可分裂,、成熟,、肥大，最終被骨組織所替換,，對(duì)于長(zhǎng)骨生長(zhǎng)具有重要作用,。幼稚的骺軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層，單個(gè)分布,、體積較小,、呈橢圓形，長(zhǎng)軸與軟骨表面平行,，越向深層的骺軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,，細(xì)胞核圓形或卵圓形，染色淺,，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些骺軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成,，稱為同源細(xì)胞群,。電鏡下，骺軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體,。在組織切片中，骺軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的骺軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。

產(chǎn)品名稱：大鼠骺軟骨細(xì)胞

組織來源：生長(zhǎng)板組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骺軟骨采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化并軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骺軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒

Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤蛋白(PP)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumancicaicialPemphigoid,CP試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒

組(leucine)含量比色法定量試劑盒20次

humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒

魚免疫球蛋白M(IgM)試劑盒

Human collagen aoaibody (CLA) ELISA Kit 人抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒

PorcineAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforADRA1A(Mouseadrenergicalpha-1Areceptor)ELISAKit小鼠能a1A受體

血液乙醇脫氫酶IV活性比色法定量試劑盒20次

MouseSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISAKit小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒

豬白介素1(IL-1)ELISAKit   ELISA. 

豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit   ELISA. 

豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISAKit   ELISA. 

豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit   ELISA.

THPO重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mgChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰受體M2(抗原)

ELK1重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

AK2 Protein Human 重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

CA12 Others Human 人 CA12 人細(xì)胞裂解液   真皮成纖維細(xì)胞Many   CD7 Others Human 人 CD7 人細(xì)胞裂解液   IGFBP5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標(biāo)簽) 小鼠原代子宮成纖維細(xì)胞 大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞

大鼠骺軟骨原代細(xì)胞胰淀素(IAPP)重組蛋白 Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)

ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TFPI重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

M. VIRIDIFACIENS NA Protein M.viridifaciens 重組綠色小單孢菌 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein