大鼠海綿體平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代心肌細(xì)胞 HCT 116(人結(jié)腸癌細(xì)胞) SHG-44 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 1ml/T75 Lewis瘤 肺癌 Huh-7 人肝癌細(xì)胞 小鼠原代毛囊細(xì)胞

大鼠海綿體平滑肌原代細(xì)胞

大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞分離自海綿體組織,；海綿體,，又稱海綿體肌,，是最硬的平滑肌和結(jié)締組織,。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅厚的白膜,，內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架,，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞,、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分,。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中，在消化海綿體組織時,，膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系,，破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接,。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細(xì)胞。平滑肌,，是非橫紋肌的肌肉組織,。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱,、子宮,、男性和女性生殖道、消化道,、呼吸道,、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細(xì)胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。

產(chǎn)品名稱：大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞

組織來源：海綿體組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠海綿體平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠海綿體平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒

HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanChorionicGonadoophinβ,β-CG試劑盒人絨毛膜β(β-CG)試劑盒

總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10次

HumanSalusinαELISAKit人Salusin-α試劑盒

植物滲調(diào)蛋白(Osmotins)試劑盒

Human ai glucoprotein 210 (gp210) ELISA Kit 人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒

PorcineInsulin,INSELISAKit 豬胰島素(INS)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforaFGF-1ELISAKit大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子1

血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性比色法定量試劑盒20次

Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒

脂褐質(zhì)測試盒   Lipfuscin test box

脂蛋白（a）[LP（a）]測試盒   Lipoprotein (a) [LP (a)] test case

游離脂肪酸（NEFA）測試盒   Free fatty acid (NEFA) test case

脂肪酶測試盒   Lipase test kit

TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 Protein

T4-BSA 甲狀腺素T4偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgT4-BSA 甲狀腺素T4偶聯(lián)牛血清白蛋白

FLT3重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AKT2 Protein Human 重組人 AKT2 / protein kinase B β / PKB beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

PLAT Protein Human 重組人 tPA / PLAT 蛋白

C7 Others Human 人 C7 / Compleme compone 7 人細(xì)胞裂解液   ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞)  CL-0263BGC-803(人胃癌細(xì)胞) 貓腎細(xì)胞;F81  CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株) 小鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 小鼠原代海馬神經(jīng)元細(xì)胞

大鼠海綿體平滑肌原代細(xì)胞催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein

NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein