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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠海馬神經(jīng)元采用消化法,、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠海馬神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠海馬神經(jīng)元原代細胞 | 組織來源 | 腦海馬體 |
英文名稱 | Rat Hippocampal Neuron Cells | 貨號 | YS-01X7348 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠海馬神經(jīng)元細胞分離自海馬體,；海馬體(Hippocampus),，又名海馬回、海馬區(qū),、大腦海馬,，海馬體主要負責(zé)記憶和學(xué)習(xí)。海馬神經(jīng)元細胞是海馬區(qū)的主要細胞組成,，主要功能是參與近期記憶,、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié)、是老年性癡呆,、癲癇等疾病的主要病灶之一,。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng)，在學(xué)習(xí),、記憶,、情緒反應(yīng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用，而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細胞聚集區(qū),，具有高度序化板層結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元相對獨立分布的特點,，境界相對清晰，便于取材,，因此,，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究者當(dāng)做理想的實驗?zāi)Ｐ汀：ｑR神經(jīng)元細胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細胞生物學(xué)特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型,，其在神經(jīng)生物學(xué),，發(fā)育生物學(xué)體外實驗研究中已被廣泛應(yīng)用,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞,；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒
Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人受體(VD R)試劑盒
Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancholesterol,CH試劑盒人(CH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
紫外線處理DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物B12(VB12)ELISA 試劑盒
Human ai somatic muscle aibody (ASA) ELISA Kit 人抗骨骼肌抗體(ASA)試劑盒
PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit 豬血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAFP甲胎蛋白定量(一/二步夾心法)
血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1(ACE1)活性熒光定量試劑盒20次
MouseTestoterone,TELISAKit小鼠睪同(T)試劑盒
脂聯(lián)素 英文名稱： Adiponectin 英文縮寫： APN/ADP 規(guī)格：
脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 英文名稱： Adipocyte Fatty Acid Binding Protein 英文縮寫： a FABP 規(guī)格：
載脂蛋白 英文名稱： Apolipoprotein 英文縮寫： AI 規(guī)格：
抗Livin 抗體 英文名稱： Ailivin aibody 英文縮寫： ALA 規(guī)格：
HA重組甲型流感 H3N2 (A/California/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PBEF (CT 0.5mgPBEF (CT) 內(nèi)脂素/B細胞克隆增強因子
EPHA7重組人 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
CGREF1 Protein Human 重組人 CGREF1 蛋白
BSG Protein Human 重組人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (Fc 標簽)
C6/36 白紋伊蚊細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12] T淋巴細胞白血病細胞，HuT78細胞 Mv.1.Lu(NBL-7)細胞,，貂肺上皮細胞 RPS6KB1 Others Human 人 PS6K / RPS6KB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 小鼠原代子宮微血管內(nèi)皮細胞 人原代脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細胞
大鼠海馬神經(jīng)元原代細胞SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine 0.5mgSPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 富含半胱的酸性分泌蛋白抗原
IL2 Protein Human 重組人 IL2 / Interleukin-2 蛋白 (L35M, L36S, C142A)
SPOCK1重組人 SPOCK1 / Testican 1 蛋白 (aa 21-429, His 標簽) Protein
RBP4 Protein Human 重組人 RBP4 蛋白
CD36重組人 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
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