大鼠骨髓樹突狀原代細(xì)胞(DC細(xì)胞)公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞) HL-60 人早幼粒急性白血病細(xì)胞 1ml/T75 JM 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 NCI-H1650 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

大鼠骨髓樹突狀原代細(xì)胞(DC細(xì)胞)

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用,，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌,、病毒等,；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓,。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大,，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；DC細(xì)胞,，全稱樹突狀細(xì)胞(DC),，是近年來倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞(APC)，能攝取,、加工及呈遞抗原,，啟動T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn),，從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞，因其細(xì)胞膜向外伸出,，形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起,，故而命名為樹突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強的遷移能力,，成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,，處于啟動、調(diào)控,、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié),。

產(chǎn)品名稱：大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

組織來源：骨髓

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 半貼半懸浮

細(xì)胞形態(tài) 樹突狀

傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠骨髓DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細(xì)胞,、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠骨髓樹突狀經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒

植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒

豚鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒 ,，英文名： cGMP ELISA Kit

Human hepatitis D virus IgG (HDV IgG) ELISA Kit 人丁型肝IgG(HDV IgG)試劑盒

MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 猴載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforbFGF-4ELISAKit大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子4

細(xì)菌色酶比色法定量試劑盒20次

RabbitIerleukin17,IL-17ELISAKit兔白介素17(IL-17)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISAKit   ELISA. 

豬低分子肝素(LMWH)ELISAKit   ELISA. 

豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISAKit   ELISA. 

雙氫睪(DHT)ELISAKit   ELISA.

TFPI重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

胰淀素(IAPP)重組蛋白 Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

M. VIRIDIFACIENS NA Protein M.viridifaciens 重組綠色小單孢菌 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標(biāo)簽)

BTC Protein Human 重組人 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)  小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1  大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6  人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0 癌細(xì)胞， 羊原代肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞 人原代膀胱成纖維細(xì)胞

大鼠骨髓樹突狀原代細(xì)胞(DC細(xì)胞)2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid 5mg2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) 2,，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)血藍(lán)蛋白

IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白

YWHAE重組小鼠 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / interleukin 3 蛋白

NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。