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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠骨髓單核采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠骨髓單核經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠骨髓單核原代細胞 | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Rat Bone Marrow Monocyte Cells | 貨號 | YS-01X7469 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠骨髓單核細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細菌,、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體,。因此,，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓。出生時,，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞，在骨髓細胞中約占0.04%,，被認為是破骨細胞的前體細胞,，較外周血單個核細胞誘導的破骨細胞得率高、全骨髓誘導法產(chǎn)生的破骨細胞數(shù)量多,，純度高,，較脾細胞誘導法分化效率高。骨髓單核細胞（BMMNCs）是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞,，它屬干細胞類型,。目前，大多數(shù)研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞,，最近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 巨噬細胞樣
傳代特性 不增殖,；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒
Rat annexin V (ANX- V) ELISA Kit 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒
Humansecretieceptor,SRELISAKit 人促胰液素/分泌素受體(SR)試劑盒 進口分裝
Humanai-Reticulinaibody,ARA試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)試劑盒
植物細胞原生質(zhì)體電轉試劑盒10次
HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKit人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒
豬雌激素(E)ELISA 試劑盒
Human macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 人巨噬細胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒
Porcinegasieceptor,GsaRELISAKit 豬促胃液素受體(GsaR)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforALP-B(MouseBone-specificAlkphaseB)ELISAKit小鼠骨特異性堿性0酸酶B
血液0酸二酯酶5(PDE5)活性酶連續(xù)循環(huán)定0比色法定量試劑盒20次
Mouseα-Glucosidase,a-GluELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)試劑盒
人轉化生長因子α(TGF-α)試劑盒 96T/48T
人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)試劑盒 96T/48T
人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)試劑盒 96T/48T
人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)試劑盒 96T/48T
MDGA2重組小鼠 MDGA2 / MAMDC1 蛋白 Protein
BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein 0.5mgBCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關蛋白(抗原)
LRP10重組人 LRP10 蛋白 Protein
IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 (isoform a, His 標簽)
CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)
BRL-3A細胞,，大鼠正常肝細胞 SK-N-SH(神經(jīng)母細胞瘤細胞) 人髓母細胞瘤細胞;Daoy Hs 578T人癌細胞 Hs human breast cancer cell line 578T DMEM+10%FBS CW-2細胞,，結腸腺癌細胞 皮膚T細胞淋巴瘤,Hut-78細胞 羊原代睪丸內(nèi)膜成纖維細胞 羊原代肺動脈平滑肌細胞
大鼠骨髓單核原代細胞NT-3 神經(jīng)生長因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神經(jīng)生長因子-3(抗原)
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 標簽)
IL12B重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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