大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 CT26.WT(小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞) U937(U-937) 人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 1ml/T75 Huh-7 人肝癌細(xì)胞 801-D 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠原代全骨髓細(xì)胞

大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干原代細(xì)胞

大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞分離自股骨,、脛骨；骨內(nèi)膜是一層致密結(jié)締組織膜,，覆蓋在骨的表面(關(guān)節(jié)面除外),，新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色，含有豐富的血管,、神經(jīng)和成骨細(xì)胞,。此外，附著于骨的肌腱,、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起,。因而骨內(nèi)膜與骨質(zhì)結(jié)合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管,、神經(jīng),，通過(guò)骨質(zhì)的滋養(yǎng)孔分布于骨質(zhì)和骨髓。骨內(nèi)膜分內(nèi),、外兩層,，外層主要是粗大的膠原纖維束，部分纖維穿入骨質(zhì),，使骨內(nèi)膜固定于骨面,；內(nèi)層疏松，含成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞(分別具有產(chǎn)生新骨質(zhì)和改建骨的功能),。骨髓腔和骨松質(zhì)的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結(jié)締組織膜,，叫做骨膜。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的能力,，以形成新骨質(zhì)和破壞,、改造已生成的骨質(zhì)，所以對(duì)骨的發(fā)生,、生長(zhǎng),、修復(fù)等具有重要意義。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞，可以向骨,、軟骨,、肌組織、皮膚,、脂肪,、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞,。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,，在培養(yǎng)過(guò)程中，受貼壁時(shí)間,、種植密度,、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響,。

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞

組織來(lái)源：股骨、脛骨

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

方法簡(jiǎn)介

普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干采用沖洗骨髓,、消化骨內(nèi)膜、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)

普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類(lèi),；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。

小鼠降鈣素(CT)ELISA 試劑盒

Pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒

HumangranulysinELISAKit 人顆粒溶素(granulysin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-doublesandedDNA,dsDNA試劑盒人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物脊髓過(guò)氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感(DTNB)比色法定量試劑盒20次

HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit人XC趨化因子受體1(XCR1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 ，英文名： CAM ELISA Kit

Human dopamine (DA) ELISA Kit 人多巴胺(DA)試劑盒

Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit 兔子抗粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBFELISAKit大鼠B因子

細(xì)菌鐵型亞鹽還原酶活性比色法定量試劑盒20次

rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit   ELISA. 

大鼠C(VC)ELISAKit   ELISA. 

大鼠B6(VB6)ELISAKit   ELISA.

WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein

催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白

BHK 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞  大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1] 肝癌細(xì)胞,，QGY-7703細(xì)胞 ST2/o細(xì)胞，小鼠雜交瘤細(xì)胞  FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 (aa 400-821) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 羊原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 大鼠原代骨骼肌成纖維細(xì)胞

大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干原代細(xì)胞CD169/sialoadhesin(Sn 0.5mgCD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原

AGO3 Protein Human 重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EPOR重組小鼠 EPOR 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白

IL17RC重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標(biāo)簽) Protein