大鼠骨內(nèi)膜間充質干原代細胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代腎上腺皮質細胞 CT26.WT(小鼠結腸癌細胞) U937(U-937) 人組織細胞淋巴瘤細胞 1ml/T75 Huh-7 人肝癌細胞 801-D 人大細胞肺癌細胞 小鼠原代全骨髓細胞

大鼠骨內(nèi)膜間充質干原代細胞

大鼠骨內(nèi)膜間充質干細胞分離自股骨,、脛骨；骨內(nèi)膜是一層致密結締組織膜,，覆蓋在骨的表面(關節(jié)面除外),，新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色，含有豐富的血管,、神經(jīng)和成骨細胞,。此外，附著于骨的肌腱,、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起,。因而骨內(nèi)膜與骨質結合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管,、神經(jīng),，通過骨質的滋養(yǎng)孔分布于骨質和骨髓。骨內(nèi)膜分內(nèi),、外兩層,，外層主要是粗大的膠原纖維束，部分纖維穿入骨質,，使骨內(nèi)膜固定于骨面,；內(nèi)層疏松，含成骨細胞和破骨細胞(分別具有產(chǎn)生新骨質和改建骨的功能),。骨髓腔和骨松質的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結締組織膜,，叫做骨膜。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細胞和破骨細胞的能力,，以形成新骨質和破壞,、改造已生成的骨質，所以對骨的發(fā)生,、生長,、修復等具有重要意義。骨內(nèi)膜間充質干細胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,，可以向骨,、軟骨、肌組織,、皮膚,、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,，因此可以作為組織工程中的種子細胞,。骨內(nèi)膜間充質干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高，在培養(yǎng)過程中,，受貼壁時間,、種植密度,、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響,。

產(chǎn)品名稱：大鼠骨內(nèi)膜間充質干細胞

組織來源：股骨、脛骨

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

方法簡介

普諾賽實驗室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質干采用沖洗骨髓,、消化骨內(nèi)膜、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測

普諾賽實驗室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。

3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。

小鼠降鈣素(CT)ELISA 試劑盒

Pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒

HumangranulysinELISAKit 人顆粒溶素(granulysin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-doublesandedDNA,dsDNA試劑盒人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物脊髓過氧化酶(MPO)活性高質敏感(DTNB)比色法定量試劑盒20次

HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit人XC趨化因子受體1(XCR1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 ，英文名： CAM ELISA Kit

Human dopamine (DA) ELISA Kit 人多巴胺(DA)試劑盒

Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit 兔子抗粒細胞顆?？贵w(ANGA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBFELISAKit大鼠B因子

細菌鐵型亞鹽還原酶活性比色法定量試劑盒20次

rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit   ELISA. 

大鼠C(VC)ELISAKit   ELISA. 

大鼠B6(VB6)ELISAKit   ELISA.

WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein

催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白

BHK 敘利亞倉鼠腎細胞  大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1] 肝癌細胞,，QGY-7703細胞 ST2/o細胞，小鼠雜交瘤細胞  FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 (aa 400-821) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 羊原代骨髓間充質干細胞 大鼠原代骨骼肌成纖維細胞

大鼠骨內(nèi)膜間充質干原代細胞CD169/sialoadhesin(Sn 0.5mgCD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原

AGO3 Protein Human 重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 (His 標簽)

EPOR重組小鼠 EPOR 蛋白 (His 標簽) Protein

DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白

IL17RC重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標簽) Protein