大鼠骨骼肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞 CRFK(貓細(xì)胞) Dami 人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 1ml/T75 HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞 Saos-2 人成骨肉瘤細(xì)胞 小鼠原代乳腺成纖維細(xì)胞

大鼠骨骼肌原代細(xì)胞

大鼠骨骼肌細(xì)胞分離自四肢肌肉組織,；骨骼肌又稱橫紋肌,，肌肉中的一種,，約占全身重量的40%,。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,，肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,，其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,，有豐富的血管,、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng),。肌肉可根據(jù)共形狀、大小,、位置,、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名,。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌、三角肌,、梨狀肌等,。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋,，核很多,，且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維,。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）,。明帶染色較淺，而暗帶染色較深,。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線,。H線的中部有一M線。明帶中間,，有一條較暗的線稱為Z線,。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段，叫做一個(gè)肌節(jié),。骨骼肌細(xì)胞也稱橫紋肌細(xì)胞,，細(xì)胞呈纖維狀，不分支,，有明顯橫紋,，核很多，且都位于細(xì)胞膜下方,，細(xì)胞多呈梭行,，具有一定的方向性。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。

產(chǎn)品名稱：大鼠骨骼肌細(xì)胞

組織來源：骨骼肌組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨骼肌采用膠原酶消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨骼肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

小鼠降鈣素原(PCT)ELISA 試劑盒

People mumps virus IgG ELISA Kit 人腮腺病毒IgG 試劑盒

HumanmembraneIgD,mIgDELISAKit 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgM試劑盒人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(高多糖/酚)50次

Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠泛素(Ub)試劑盒 ,，英文名： Ub ELISA Kit

Human calreticulin (C) ELISA Kit 人鈣網(wǎng)蛋白(C)試劑盒

rabbitProstaglandinE1,PGE1ELISAKit 兔子前列腺素E1(PGE1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforB7-2/sCD86(HumansolubleClusterofdiffereiation86)ELISAKit人可溶性CD86

線蟲甲磺酸乙脂誘導(dǎo)突變?cè)噭┖?span>10次

RabbitB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit兔子B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒   小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒、小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白試劑盒   小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白試劑盒,、小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒,、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒   豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：豚鼠主要組織相容性復(fù)合體試劑盒,、豚鼠主要組織相容性復(fù)合體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

ITK重組小鼠 ITK Kinase 蛋白 (aa 351-619, His & GST 標(biāo)簽) Protein

簇集蛋白(CLU)重組蛋白 Recombinant Clusterin (CLU)

MBL2重組人 MBL2 / MBL / COLEC1 蛋白 Protein

IL21 Protein Human 重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白

CD83 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD83 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞)  人淋巴成纖維細(xì)胞HLF  DLD-1(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)     ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細(xì)胞裂解液   恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0904 羊原代呼吸道上皮細(xì)胞 豬原代鼻腔粘膜上皮細(xì)胞

大鼠骨骼肌原代細(xì)胞CK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原 0.5mgCK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原

AFP Protein Human 重組人 AFP / alpha-fetoprotein 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL25重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MME Protein Mouse 重組小鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LMAN2重組人 LMAN2 / VIP36 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。