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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠睪丸間質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠睪丸間質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠睪丸間質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來源 | 睪丸組織 |
英文名稱 | Rat Testicular Mesenchymal Cells | 貨號 | YS-01X7615 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細(xì)胞簡介：
大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞分離自睪丸組織,；睪丸間質(zhì)細(xì)胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈圓形,，橢圓形或不規(guī)則形,，胞體較大，直徑約20μm,，胞質(zhì)呈嗜酸性,，細(xì)胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央,，染色較淡,，有1～2個核仁線粒體多，呈管嵴狀,，無分泌顆粒,。從青春期開始，睪丸間質(zhì)細(xì)胞受垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的間質(zhì)細(xì)胞刺激素（黃體生成素）的作用,，能合成分泌雄性激素,，可促進(jìn)精子的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育，以及維持第二性征和性功能,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 試劑盒
Rat ai myocardial aibody (AMA) ELISA Kit 大鼠抗心肌抗體(AMA)試劑盒
HumanMannmabindingprotein/mannanbindinglectin,MBP/MBLELISAKit 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgA試劑盒人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒
植物果糖-1,6-二0酸縮酶(ALD)定量試劑盒20次
Humanβai-galactanproteinsIgGELISAKit人β乳糖蛋白抗體IgG試劑盒
豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒
Human ai polymyositis scleroderma aibody (PM-Scl/PM-1) ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)試劑盒
Porcinemaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAGEs(Mouseadvancedglycationendproducts)ELISAKit小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物
血液砷元素比色法定量試劑盒20次
Mousetoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISAKit小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)試劑盒
質(zhì)粒大量提取試劑盒（非柱式法） 5T
QSPlasmidMaxiKit 10T
血液(溶液型） 10ml（血量）
Relax-ISOBloodDNAKitI 50ml（血量）
TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 Protein
Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原
TXN重組人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
ALDOB Protein Human 重組人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 標(biāo)簽
NT5E Protein Mouse 重組小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標(biāo)簽)
BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人細(xì)胞裂解液 GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細(xì)胞病毒 HCMV gB 人細(xì)胞裂解液 TNFRSF17 Others Human 人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 人細(xì)胞裂解液 羊原代支氣管上皮細(xì)胞 兔原代半月板纖維軟骨細(xì)胞
大鼠睪丸間質(zhì)原代細(xì)胞PAX8(Paired box gene 8 0.5mgPAX8(Paired box gene 8) 配對盒基因8抗原
AFM Protein Human 重組人 AFM / Afamin 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BMPR1A Protein Human 重組人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
TRIB3重組人 TRIB3 / TRB3 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
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