詳細(xì)介紹
大鼠肝非實質(zhì)原代細(xì)胞
大鼠肝非實質(zhì)細(xì)胞分離自肝臟組織,;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,,位于機(jī)體中的腹部位置,,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,,胃的上方,。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官,,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細(xì)胞具有肝功能的單位,,是肝臟的基本組成單位之一,。肝非實質(zhì)細(xì)胞是指除了肝實質(zhì)細(xì)胞之外的細(xì)胞,主要包含了肝竇內(nèi)皮細(xì)胞,、肝星狀細(xì)胞,、肝枯否細(xì)胞。
英文名稱 | Rat Hepatic Nonparenchymal Cells | 組織來源 | 肝 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8229 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠肝非實質(zhì)細(xì)胞
組織來源:肝
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
大鼠肝非實質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的大鼠肝非實質(zhì)采用取肝臟灌流,、膠原酶消化、密度梯度離心法制備而來制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠肝非實質(zhì)經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒
Rat ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒
Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit 人胞漿免疫球蛋白(CIg)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanAngiopoietin2,ANG-2試劑盒人血管生成素2(ANG-2)試劑盒
植物脯羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
Lensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素(LCA)試劑盒
豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒
Human ai proteinase 3 aibody IgG (PR3 Ab-IgG) ELISA Kit 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)試劑盒
Porcinehepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit 豬肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitfora-Glu(MouseAlpha-Glucosidase)ELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶
血液乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次
Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒
植物D2(VD2)ELISAKit ELISA.
植物D3(VD3)ELISAKit ELISA.
植物D(VD)ELISAKit ELISA.
植物B6(VB6)ELISAKit ELISA.
CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原
VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein
CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白
DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白
ARG1 Others Human 人 Arginase-1 / ARG1 人細(xì)胞裂解液 EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 恒河猴腎細(xì)胞;RM-3 雪旺細(xì)胞SCM-prf CL-0155ME-180( 永生化細(xì)胞 人原代肺微血管周細(xì)胞
大鼠肝非實質(zhì)原代細(xì)胞銅藍(lán)蛋白(CP)重組蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)
AGO1 Protein Human 重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MERTK重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RPN2重組人 RPN2 / Ribophorin II 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。