大鼠肝非實質(zhì)原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代膀胱移行上皮細(xì)胞 Calu-3(人肺腺癌細(xì)胞) T-47D 人導(dǎo)管癌細(xì)胞 1ml/T75 HEL（懸?。? 紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 NCI-H661 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠原代視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞

大鼠肝非實質(zhì)原代細(xì)胞

大鼠肝非實質(zhì)細(xì)胞分離自肝臟組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,，位于機(jī)體中的腹部位置,，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方,。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官,，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹,，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細(xì)胞具有肝功能的單位,，是肝臟的基本組成單位之一,。肝非實質(zhì)細(xì)胞是指除了肝實質(zhì)細(xì)胞之外的細(xì)胞，主要包含了肝竇內(nèi)皮細(xì)胞,、肝星狀細(xì)胞,、肝枯否細(xì)胞。

產(chǎn)品名稱：大鼠肝非實質(zhì)細(xì)胞

組織來源：肝

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：懸浮

細(xì)胞形態(tài)：圓形

傳代特性：不增殖；不傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

大鼠肝非實質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

方法簡介

實驗室分離的大鼠肝非實質(zhì)采用取肝臟灌流,、膠原酶消化、密度梯度離心法制備而來制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的大鼠肝非實質(zhì)經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒

Rat ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒

Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit 人胞漿免疫球蛋白(CIg)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanAngiopoietin2,ANG-2試劑盒人血管生成素2(ANG-2)試劑盒

植物脯羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次

Lensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素(LCA)試劑盒

豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒

Human ai proteinase 3 aibody IgG (PR3 Ab-IgG) ELISA Kit 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)試劑盒

Porcinehepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit 豬肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitfora-Glu(MouseAlpha-Glucosidase)ELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶

血液乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次

Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒

植物D2(VD2)ELISAKit   ELISA. 

植物D3(VD3)ELISAKit   ELISA. 

植物D(VD)ELISAKit   ELISA. 

植物B6(VB6)ELISAKit   ELISA.

CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein

CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白

DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白

ARG1 Others Human 人 Arginase-1 / ARG1 人細(xì)胞裂解液   EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液   恒河猴腎細(xì)胞;RM-3  雪旺細(xì)胞SCM-prf  CL-0155ME-180( 永生化細(xì)胞 人原代肺微血管周細(xì)胞

大鼠肝非實質(zhì)原代細(xì)胞銅藍(lán)蛋白(CP)重組蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)

AGO1 Protein Human 重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MERTK重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RPN2重組人 RPN2 / Ribophorin II 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。