詳細(xì)介紹
大鼠肺小動脈平滑肌原代細(xì)胞
大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞分離自肺小動脈組織,;小動脈(smallartery),管徑在0.3~1mm之間,,小動脈包括粗細(xì)不等的幾級分支,,也屬肌性動脈。較大的小動脈,,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,,一般沒有外彈性膜,。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)",。典型的小動脈,,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,,當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強(qiáng)力收縮時,,其管腔可以閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi),,從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力,。如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升,。反之,,當(dāng)小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細(xì)血管,,外周阻力明顯下降,血壓降低,。終末小動脈(terminal arteri-ole)的口徑為20~30μm,;后小動脈(metar-teriole),又稱毛細(xì)血管前小動脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm,。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,,在毛細(xì)血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,,叫做毛細(xì)血管前括約?。?span>precapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量,,是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)",。
英文名稱 | Rat Pulmonary Arteriolar Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 肺小動脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7742 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞
組織來源:肺小動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
小鼠酶2(CA-2)ELISA 試劑盒
Rat activated protein C (APC) ELISA Kit 大鼠活化蛋白C(APC)試劑盒
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit 人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)試劑盒 進(jìn)口分裝
Cobravenomfactor,CVF試劑盒毒蛇因子(CVF)試劑盒
載玻片細(xì)胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseendotoxin,ETELISAKit小鼠內(nèi)毒素(ET)試劑盒
豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA 試劑盒
Human single sanded DNA aibody / denatured DNA aibody (ssDNA) ELISA Kit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)試劑盒
PorcineIerferonγ,IFN-γELISAKit 豬γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAg-NORs(HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins)ELISAKit人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白
血液乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次
MouseansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒
豬白介素1β(IL-1β)ELISAKit ELISA.
豬白介素18(IL-18)ELISAKit ELISA.
豬白血病抑制因子受體(LIFR)ELISAKit ELISA.
HA重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
PDGF-BB peptide 血小板源性生長因子-BB抗原 0.5mgPDGF-BB peptide 血小板源性生長因子-BB抗原
IFNAR2重組人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白 Protein
AGA Protein Human 重組人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白
AGS人胃腺癌細(xì)胞 Human EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8 敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1 EC871214細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞 人腦瘤細(xì)胞,SF763細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-I 小鼠腹脊髓神經(jīng)細(xì)胞(MN-vsc)(1×106) lovo, 豬原代B淋巴細(xì)胞 兔原代脂肪細(xì)胞
大鼠肺小動脈平滑肌原代細(xì)胞TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原
ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
BMP2重組斑馬魚 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein
TFPI Protein Human 重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein