大鼠肺小動脈內(nèi)皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞 BT-549(人管癌細(xì)胞) TE-1 人食管癌細(xì)胞 1ml/T75 H4 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤 MKN45-PTBP3-pslience 空質(zhì)粒 人胃癌PTBP3空白對照細(xì)胞株 小鼠原代胃平滑肌細(xì)胞

大鼠肺小動脈內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺小動脈組織,；肺動脈干是短而粗的動脈，自右心室的動脈圓錐起始,，向左后上方斜升,，先在升主動脈根部的前面，繼而至其左側(cè),，至主動脈弓的下方,，約在第5胸椎高度，分為左,、右肺動脈,。左肺動脈較短，橫行向左,，經(jīng)左主支氣管前方至左肺門，分兩支進(jìn)入左肺的上,、下葉,。右肺動脈較長，橫行向右,，經(jīng)主動脈升部和上腔靜脈的后方達(dá)右肺門,，分3支進(jìn)入右肺上、中,、下葉,。左、右肺動脈的各分支在肺實質(zhì)內(nèi)又反復(fù)分支,，與支氣管的分支伴行,，最后達(dá)肺泡壁,，形成稠密的毛細(xì)血管網(wǎng)。肺動脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血,。在肺動脈干分叉處稍左側(cè)與主動脈弓下緣之間有一結(jié)締組織索,，稱動脈韌帶。管徑在0.3～1mm之間,，為小動脈（small-artery）,，小動脈包括粗細(xì)不等的幾級分支，也屬肌性動脈,。較大的小動脈,，內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜，中膜有幾層平滑肌,，外膜厚度與中膜相近,，一般沒有外彈性膜?？趶皆?span>1mm以下的動脈,，管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質(zhì)纖維。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,，也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)",。典型的小動脈，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2,。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,，當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強(qiáng)力收縮時，其管腔可以閉塞,，而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi),，從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,，可使血壓顯著上升,。反之，當(dāng)小動脈的平滑肌舒張時,，則可使大量的血液流入毛細(xì)血管,，外周阻力明顯下降，血壓降低,。終末小動脈(terminal arteri-ole)的口徑為20～30μm,；后小動脈(metar-teriole)，又稱毛細(xì)血管前小動脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12～15μm,。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,，在毛細(xì)血管前小動脈分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚,，叫做毛細(xì)血管前括約肌(precapillary sphinc-ter),，其收縮或舒張,，可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量，是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)",。支配小動脈平滑肌的交感神經(jīng)纖維,，可延伸到終末小動脈和后小動脈的平滑肌細(xì)胞。在毛細(xì)血管前括約肌上交感神經(jīng)纖維特別豐富,。肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布,，該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì),、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用,。

產(chǎn)品名稱：大鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：肺小動脈

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含FBS,、EGF、bFGF,、IGF,、VEGF、Heparin,、Hydrocortisone,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

大鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實驗室分離的大鼠肺小動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的大鼠肺小動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 試劑盒

Rat alkaline phosphatase (ALP) ELISA Kit 大鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒

HumanFreeProteinS,FP-SELISAKit 人游離蛋白S(FP-S)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRab試劑盒人乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒

正常人體腸組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit小鼠抗粒/中心體抗體(ACA)試劑盒

豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA 試劑盒

Human ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)試劑盒

Porcinetelomerase,TEELISAKit 豬端粒酶(TE)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAGPA/PCA(Humanai-gasicparietalcellaibody)ELISAKit人抗胃壁細(xì)胞抗體

血液人類巨細(xì)胞病毒蛋白酶(HCMVPROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20次

Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)試劑盒

小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)試劑盒   96T/48T

小鼠壞死因子樣弱凋亡因子（TWEAK）試劑盒   96T/48T

小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)試劑盒   96T/48T

小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)試劑盒   96T/48T

BST1重組大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Galanin 神經(jīng)節(jié)肽 0.5mgGalanin 神經(jīng)節(jié)肽

CXCL1重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽) Protein

AGER Protein Human 重組人 AGER / RAGE 蛋白

SLAMF8 Protein Mouse 重組小鼠 SLAMF8 / BLAME 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ADK Others Human 人 ADK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   Hce-8693(人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化))     家貓肺細(xì)胞;FCA-L1  心室肌細(xì)胞Many   C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞  HGC-27人胃癌細(xì)胞 Human 豬原代II型肺泡上皮細(xì)胞 小鼠原代晶狀體上皮細(xì)胞

大鼠肺小動脈內(nèi)皮原代細(xì)胞Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原)

CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白

LYPD3重組小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein

ENPEP Protein Rat 重組大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 標(biāo)簽)

NLK重組人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。