詳細介紹
大鼠肺大靜脈平滑肌原代細胞
大鼠肺大靜脈平滑肌細胞分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,,是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對,,共4條,,兩條連接右肺,兩條連接左肺,。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,,是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,,肺循環(huán)具有血壓低,、阻力小和順應性大的特點,肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力,,要維持肺循環(huán)的低壓,、低阻的狀態(tài),必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,,血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈,,再入左心室,經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán),,才能避免肺動脈內壓力升高,。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,,細胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細胞匯合,,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏;細胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。該細胞參與血管壁炎癥反應,,保持靜脈管腔的通暢,還是多數(shù)動脈疾病的靶細胞,。
英文名稱 | Rat Pulmonary Great Vein Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 肺靜脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7042 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠肺大靜脈平滑肌細胞
組織來源:肺靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
方法簡介
普諾賽實驗室分離的大鼠肺大靜脈平滑肌采用 - 膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
普諾賽實驗室分離的大鼠肺大靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒
Kappa aibodies to human immunoglobulin light chain (-IgLC) ELISA Kit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)試劑盒
HumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit 人類白細胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒 96T/48T 進口分裝
FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP試劑盒魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母蛋白巰基/結合巰基含量比色法定量試劑盒20次
MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit小鼠補體片斷3a(C3a)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠B6(VB6)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat bone morphogenetic protein 6 (BMP-6) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒
HumanCCAAT/enhancerbindingproteinbeta,C/EBPβELISAKit 人CCAAT增強子結合蛋白β(C/EBPβ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenLipopolysaccharides,LPS試劑盒雞脂多糖/內毒素(LPS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞MAPK蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit小鼠胃腸癌標志物CA199試劑盒規(guī)格:96T/48T
整合素α2β1 英文名稱: Iegrin α2β1 規(guī)格: 英文縮寫: Iegrin α2β1
整合素α5β3 英文名稱: Iegrin α5β3 規(guī)格: 英文縮寫: Iegrin α5β3
β-整合素 英文名稱: β-Iegrin 規(guī)格: 英文縮寫: β-Iegrin
誘導型合酶 英文名稱: induced niic oxide syhas 規(guī)格: 英文縮寫: iNOS
MERTK重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
銅藍蛋白(CP)重組蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)
RPN2重組人 RPN2 / Ribophorin II 蛋白 (His 標簽) Protein
AGO1 Protein Human 重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)
ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細胞裂解液 前列腺上皮細胞生長添加物PEpiCGS DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 非洲綠猴腎細胞;VERO LCC1 豬原代骨骼肌細胞 大鼠原代下丘腦神經(jīng)元細胞
大鼠肺大靜脈平滑肌原代細胞神經(jīng)顆粒素(NRGN)重組蛋白 Recombinant Neurogranin (NRGN)
IL3RA Protein Human 重組人 IL3RA / CD123 蛋白 (His & Fc 標簽)
FKBP1A重組人 FKBP12 蛋白 Protein
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
LPAL2重組人 LPAL2 蛋白 (Fc 標簽) Protein