大鼠肺大靜脈平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代脊髓神經(jīng)元細(xì)胞 BGC823(人胃癌細(xì)胞) AGS 人胃腺癌細(xì)胞 1ml/T75 EJ 人膀胱癌細(xì)胞 GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 Rattus 小鼠原代雪旺氏細(xì)胞

大鼠肺大靜脈平滑肌原代細(xì)胞

大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞分離自肺大靜脈組織,；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,，把動脈血由肺送回心臟的靜脈,，是一個靜脈里流動脈血的血管,。左右1對,，共4條，兩條連接右肺,，兩條連接左肺,。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,，是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓,。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低,、阻力小和順應(yīng)性大的特點,，肺動脈壓力高低取決于單位時間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環(huán)的低壓,、低阻的狀態(tài),，必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細(xì)血管進(jìn)入肺靜脈,，再入左心室,，經(jīng)過左心室收縮進(jìn)入體循環(huán)，才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高,。肺大靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏,；細(xì)胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。該細(xì)胞參與血管壁炎癥反應(yīng)，保持靜脈管腔的通暢,，還是多數(shù)動脈疾病的靶細(xì)胞,。

產(chǎn)品名稱：大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞

組織來源：肺靜脈組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

方法簡介

普諾賽實驗室分離的大鼠肺大靜脈平滑肌采用 - 膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

普諾賽實驗室分離的大鼠肺大靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。

小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒

Kappa aibodies to human immunoglobulin light chain (-IgLC) ELISA Kit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)試劑盒

HumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit 人類白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP試劑盒魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量試劑盒20次

MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit小鼠補體片斷3a(C3a)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠B6(VB6)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat bone morphogenetic protein 6 (BMP-6) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinbeta,C/EBPβELISAKit 人CCAAT增強子結(jié)合蛋白β(C/EBPβ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenLipopolysaccharides,LPS試劑盒雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞MAPK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199試劑盒規(guī)格：96T/48T

整合素α2β1   英文名稱：   Iegrin α2β1   規(guī)格：      英文縮寫：   Iegrin α2β1

整合素α5β3   英文名稱：   Iegrin α5β3   規(guī)格：      英文縮寫：   Iegrin α5β3

β-整合素   英文名稱：   β-Iegrin   規(guī)格：      英文縮寫：   β-Iegrin

誘導(dǎo)型合酶   英文名稱：   induced niic oxide syhas   規(guī)格：      英文縮寫：   iNOS

MERTK重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

銅藍(lán)蛋白(CP)重組蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)

RPN2重組人 RPN2 / Ribophorin II 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AGO1 Protein Human 重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細(xì)胞裂解液   前列腺上皮細(xì)胞生長添加物PEpiCGS  DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細(xì)胞裂解液   非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO  LCC1 豬原代骨骼肌細(xì)胞 大鼠原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞

大鼠肺大靜脈平滑肌原代細(xì)胞神經(jīng)顆粒素(NRGN)重組蛋白 Recombinant Neurogranin (NRGN)

IL3RA Protein Human 重組人 IL3RA / CD123 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

FKBP1A重組人 FKBP12 蛋白 Protein

HA Protein Influenza 重組甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

LPAL2重組人 LPAL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein