大鼠成骨原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 ACHN(人癌細(xì)胞) 動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 CoC1（懸浮） 癌 HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞 Human 小鼠原代陰道壁成纖維細(xì)胞

大鼠成骨原代細(xì)胞

大鼠成骨細(xì)胞分離自顱骨組織,；顱骨位于脊柱上方,，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),，起著保護(hù)和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用,。顱分腦顱和面顱兩部分,。腦顱位于顱的后上部，內(nèi)有顱腔,，容納腦,，共8塊。面顱為顱的前下部分,，包含眶,、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu),，構(gòu)成面部的支架,，共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞,，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成,、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建,，骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域,，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),，形成骨吸收陷窩,；其后，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位,，分泌骨基質(zhì),，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制,、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，也是藥物篩選,、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段,。

產(chǎn)品名稱：大鼠成骨細(xì)胞

組織來源：顱骨組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠成骨采用先用短時(shí)間消化,、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠成骨經(jīng)ALP染色檢測,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

小鼠三腺原酸(T3)試劑盒

People in morphine peptide -2 (EM-2) ELISA Kit 人內(nèi)嗎非肽-2(EM-2)試劑盒

Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISAKit 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineaPigadvancedglycationendproducts,AGEs試劑盒豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量試劑盒20次

Mousec-junELISAKit小鼠c-jun試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 ,，英文名： CCK ELISA Kit

Human dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 人多巴胺D2受體(D2R)試劑盒

Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 兔子酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-TG(RabbitBeta-Thromboglobulin)ELISAKit兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白

細(xì)菌銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量試劑盒20次

rabbitInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人總鐵結(jié)合力（TIBC）試劑盒   96T/48T

人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒   96T/48T

人總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒   96T/48T

人總蛋白（TP）試劑盒   96T/48T

BMP2重組斑馬魚 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原

ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

TFPI Protein Human 重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

A498細(xì)胞,，人腎癌細(xì)胞系 蝙蝠肺細(xì)胞,Tb 1 Lu細(xì)胞 CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞)  Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)     HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞， 豬原代氣管上皮細(xì)胞 人原代腦血管周細(xì)胞

大鼠成骨原代細(xì)胞phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185 0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原

CEP57 Protein Human 重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

NA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) Protein

PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白

EGFR重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。