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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的大鼠腸動脈平滑肌采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠腸動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠腸動脈平滑肌原代細胞 | 組織來源 | 腸動脈 |
英文名稱 | Rat Intestinal Artery Smooth Muscle Cells | 貨號 | YS-01X8221 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠腸動脈平滑肌細胞分離自腸系膜動脈組織,；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段,，也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段,。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的，大腸主要濃縮食物殘渣,，形成糞便,，再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng),。腸系膜動脈由背大動脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi),，分布于消化管的動脈。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈,。前者主要分布于小腸左側(cè),，后者分布于結腸、大腸,、泄殖腔等處,。腸動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
大鼠腸動脈平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
小鼠仙臺病毒抗體(HVJ-Ab)試劑盒
Rat bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒
Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit 人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)試劑盒 進口分裝
ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70試劑盒雞熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒
載玻片細胞CDK3蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒
豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA 試劑盒
Human macrophage colony stimulating factor receptor (M-CSFR) ELISA Kit 人巨噬細胞集落刺激因子受體(M-CSFR)試劑盒
PorcinevonWillebrandFactor,vWFELISAKit 豬血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha1-AT(HumanAlpha1-Aiypsin)ELISAKit人α1抗
血液0酸二酯酶1(PDE1)活性熒光定量試劑盒10次
Mouseβ-Defensins,β-DFELISAKit小鼠β-防御素(β-DF)試劑盒
人組織蛋白酶K(cath-K)ELISAKit ELISA.
人骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit ELISA.
人醇結合蛋白4(RBP-4)ELISAKit ELISA.
FKBP1A重組人 FKBP12 蛋白 Protein
神經(jīng)顆粒素(NRGN)重組蛋白 Recombinant Neurogranin (NRGN)
LPAL2重組人 LPAL2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IL3RA Protein Human 重組人 IL3RA / CD123 蛋白 (His & Fc 標簽)
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
9204細胞,，人肝癌細胞 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞,RBL-2H3細胞 山羊腎上皮樣細胞;DG-K1 Calu-3(人肺腺癌細胞) rCSC, 大鼠心肌細胞 [CIP 104328;IAM 13570;ICMP 5794;NCPPB 2991]細胞 HBL-100(整合SV40 基因的上皮細胞) 豬原代輸尿管成纖維細胞 人原代輸精管平滑肌細胞
大鼠腸動脈平滑肌原代細胞Insulin Receptor(ISR 0.5mgInsulin Receptor(ISR) 胰島素受體(抗原)
IL7 Protein Human 重組人 IL7 / interleukin 7 蛋白
IFNB1重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 蛋白 (Fc 標簽) Protein
TH Protein Mouse 重組小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 蛋白
FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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