詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
細胞屬性:
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠腸動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠腸動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠腸動脈內(nèi)皮原代細胞 | 組織來源 | 腸組織 |
英文名稱 | Rat Intestinal Artery Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7127 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
大鼠腸動脈內(nèi)皮細胞分離自腸動脈,;腸道指的是從胃幽門至的消化管,。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,,大腸主要濃縮食物殘渣,,形成糞便,再通過直腸經(jīng)排出體外,。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng),。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞培養(yǎng)方法:
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,,待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍,。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品:
小鼠血清(NO)ELISA 試劑盒
One target of rapamycin (mTOR) ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒
Humanβ-lactamaseELISAKit 人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor(BAX)RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit大鼠Bcl-2相關X蛋白
熒光穩(wěn)定/稀釋溶液10毫升
MouseIerleukin16,IL-16ELISAKit小鼠白介素16(IL-16)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 ,英文名: IgA ELISA Kit
Human hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 人低氧誘導因子1α(HIF-1α)試劑盒
Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 猴可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBidELISAKit大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白
細菌檸檬酸利用試劑盒20次
rabbitLeptin,LEPELISAKit兔子瘦素(LEP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
魚類釋放激素試劑盒 魚類釋放激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 魚類釋放激素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:魚類釋放激素試劑盒,、魚類釋放激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月,。
魚類白介素1α試劑盒 魚類白介素1α試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 魚類白介素1α試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:魚類白介素1α試劑盒、魚類白介素1αeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月,。
魚促上腺皮質激素試劑盒 魚促上腺皮質激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 魚促上腺皮質激素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:魚促上腺皮質激素試劑盒,、魚促上腺皮質激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬甘油三酯試劑盒 豬甘油三酯試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬甘油三酯試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬甘油三酯試劑盒,、豬甘油三酯eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月,。
CD79B重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 Protein
FGF1 (aFGF 0.5mgFGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素結合生長因子( 酸性成纖維細胞生長因子)(多肽片斷抗原)
CCL17重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 Protein
IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白
EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
786-O[786-0]細胞,腎透明細胞腺癌細胞 單核細胞白血病細胞,J-111細胞 人小細胞肺癌細胞;NCI-H209 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞Many U-2 OS細胞,,骨肉瘤細胞 人細胞系,KMB-17細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3 豬原代小腸黏膜上皮細胞 小鼠原代破骨細胞
大鼠腸動脈內(nèi)皮原代細胞Cyclin D3(C-term 0.5mgCyclin D3(C-term) 周期素D3抗原
ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (His 標簽)
TDGF1重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標簽) Protein
CD200R4 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 (His 標簽)
FABP6重組人 FABP6 / I-BABP 蛋白 Protein