詳細(xì)介紹
大鼠腸道干原代細(xì)胞
大鼠腸道干細(xì)胞分離自腸道組織,;腸道指的是從胃幽門至的消化管,。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段,。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘渣,,形成糞便,,再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng),。腸道干細(xì)胞(ISC)也稱腸道上皮干細(xì)胞,,主要位于腸黏膜隱窩內(nèi),其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān),。正常情況下,,位于隱窩基底部的腸道干細(xì)胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,整個遷移過程大約3-5d,,在遷移過程中腸道干細(xì)胞分化形成不同的腸黏膜細(xì)胞,。當(dāng)受到外界生理或病理信號作用時,,ISC可持續(xù)增殖、分化為成熟腸上皮細(xì)胞,,如腸型細(xì)胞,、杯狀細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞等,,從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性,。
英文名稱 | Rat Intestinal Stem Cells | 組織來源 | 腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7481 |
細(xì)胞形態(tài) | 球形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠腸道干細(xì)胞
組織來源:腸組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠腸道干采用-膠原酶聯(lián)合消化后,用腸道干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠腸道干經(jīng)MSI-1免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒
Human tyrosine kinase 2 (Tyk-2) ELISA Kit 人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒
Humanβ-galactosidase,βGALELISAKit 人β半乳糖苷酶(βGAL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor(DC-SIGN/CD209)ELISAKit大鼠樹突狀細(xì)胞表面特異性C型凝集素-細(xì)胞間黏附分子3結(jié)合非整合素分子
熒光定量分析20樣本
MouseIerleukin1α,IL-1αELISAKit小鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human keratan sulfate (KS) ELISA Kit 人角質(zhì)素(KS)試劑盒
Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit 人非甲基化寡核苷酸(NON)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickensecretoryimmunoglobulinA,SIgA試劑盒雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞PARP蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒規(guī)格:96T/48T
魚類狀腺原酸(T3)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
魚類(Coisol)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
魚類甲狀腺素(T4)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原
CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein
IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白
FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白
6T-CEM人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 The 6T-CEM of human T cell leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞) 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 豬原代心肌成纖維細(xì)胞 大鼠原代角質(zhì)形成細(xì)胞
大鼠腸道干原代細(xì)胞ER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原 0.5mgER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原)
ADAM15 Protein Human 重組人 ADAM15 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD164重組大鼠 CD164 / Endolyn 蛋白 Protein
ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PRSS27重組人 Pancreasin / Marapsin / PRSS27 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein