大鼠腸成纖維原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 6T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞) 角膜上皮細(xì)胞 Ca Ski 人腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞 GBC-SD, 人膽囊癌細(xì)胞 Human 小鼠原代椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

大鼠腸成纖維原代細(xì)胞

大鼠腸成纖維細(xì)胞分離自腸道組織,；腸道指的是從胃幽門至的消化管,。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段,。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,，大腸主要濃縮食物殘?jiān)?，形成糞便，再通過直腸經(jīng)排出體外,。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分,，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng),。各種哺乳動(dòng)物腸的結(jié)構(gòu)和功能基本相似。腸壁結(jié)構(gòu)一般分4層,，由外向內(nèi)依次為：漿膜層(腹腔臟層),，平滑肌層，黏膜下層和黏膜層,。平滑肌層的外層為縱行肌纖維,，內(nèi)層為環(huán)形肌纖維，兩者都以螺旋式走行,，它們以收縮和舒張來完成腸的機(jī)械性消化,。黏膜層又分為3層：靠近黏膜下層的是一層平滑肌，稱為黏膜肌層,。其次為結(jié)締組織,，又稱為固有層。最后面向腸腔的是一層柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)成的黏膜,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。

產(chǎn)品名稱：大鼠腸成纖維細(xì)胞

組織來源：腸

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

大鼠腸成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒

Rat azidothymidine (AZT) ELISA Kit 大鼠(AZT)試劑盒

HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor(Mouseai-IVIgGaibody)ELISAKit小鼠抗IVIgG抗體

飲料乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

MouseIerleukin5,IL-5ELISAKit小鼠白介素-5(IL-5)試劑盒

豬白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒

Human ai BP180 aibody (BP180-Ab) ELISA Kit 人抗BP180抗體(BP180-Ab)試劑盒

PorcineIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforALD(Humanaldosterone)ELISAKit人固同

血液鎂離子(Mg)濃度酶反應(yīng)光譜法定量試劑盒20次

MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒

小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒   小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒,、小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒   小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒、小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠試劑盒   小鼠試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠試劑盒,、小鼠eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠支原體試劑盒   小鼠支原體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠支原體試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠支原體試劑盒、小鼠支原體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

IL23重組大鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

CR (Calretinin 0.5mgCR (Calretinin) 鈣結(jié)合蛋白(抗原)

MME重組人 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白

RTN4R Protein Mouse 重組小鼠 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615  非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgR;VERO/IgR  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-29  HL-60細(xì)胞,，早幼粒急性白血病細(xì)胞系 人T細(xì)胞淋巴瘤,Hurt-78細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C2  人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 豬原代胸腺成纖維細(xì)胞 豬原代B淋巴細(xì)胞

大鼠腸成纖維原代細(xì)胞CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7 0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 型乙酰受體α7(多肽)

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白

SPINT2重組小鼠 HAI-2 / SPINT2 蛋白 Protein

ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

RAC2重組人 RAC2 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。