大鼠表皮角化上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 22RV1(人前列腺癌細(xì)胞) 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 BT474 人導(dǎo)管癌細(xì)胞 RL95-2, 人內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 Human 小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞

大鼠表皮角化上皮原代細(xì)胞

大鼠表皮角化細(xì)胞分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層,，由胚胎時期外胚層形成,，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層，即基底層,、棘層,、顆粒層、透明層和角質(zhì)層,。表皮角化細(xì)胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分,，在體內(nèi)處于不斷增殖過程中，分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層,，少數(shù)位于棘細(xì)胞層,。隨著向表層的推移，細(xì)胞的分化程度逐漸增加,，并喪失分裂活性,。

產(chǎn)品名稱：大鼠表皮角化上皮細(xì)胞

組織來源：皮膚組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠表皮角化上皮細(xì)胞先蛋白酶消化,、后-膠原酶混合消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠表皮角化上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

小鼠氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)試劑盒

Hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒

Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor15-LO/LOX(Mouse15-lipoxygenase)ELISAKit小鼠15脂加氧酶

飲料比色法定量試劑盒20次

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 試劑盒 96T/48T

One Japanese encephalitis aibody IgG (JE IgG) ELISA Kit 人流行性乙型腦抗體IgG(JE IgG)試劑盒

HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 人B細(xì)胞受體(BCR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κB試劑盒雞核因子κB(NF-κB)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞P38蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物草酸氧化酶(OxO)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

植物25羥基D3(25(OH)D3/25HVD3)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚脫酶3（DIO3）ELISA試劑盒     ELISA   組裝/原裝

魚脫酶2（DIO2）ELISA試劑盒     ELISA   組裝/原裝

DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

蛋白激酶Cδ(PKCδ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

AHSP重組人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein

IL21R Protein Human 重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

5E Others Rat 大鼠 CD73 / 5E 人細(xì)胞裂解液   SMC-1(人胸膜瘤細(xì)胞)  胃黏膜上皮Many   CL-0233THP-1(人髓系白血病單核細(xì)胞) 豬原代胰腺腺泡上皮細(xì)胞 大鼠原代頜骨骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

大鼠表皮角化上皮原代細(xì)胞趨化因子C-C-基元受體2(CCR2)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2)

ABL1 Protein Human 重組人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

DLL4重組人 DLL4 蛋白  Protein

HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MMP12重組人 MMP12 / MMP-12 / HME 蛋白 (catalytic domain) Protein