詳細介紹
操作流程:
收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質粒抽提——>質粒測序——>測序結果分析——>克隆信息輸入數據庫——>質粒實物保存,。
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產品名稱 | 真核生物18S核酸檢測試劑盒PCR-熒光探針法 | 規(guī)格 | 48T |
用途 | 僅供科研研究實驗 | 檢測法 | PCR-熒光探針法 |
品牌 | 上研生 | 貨號 | YS-YP3357 |
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用方法:
注:所有試劑使用前需解凍,,混合均勻,,6,000rpm離心數秒后使用。
1.樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,,可直接使用,。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl,、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液,、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管),。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶,。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū),。 2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物,、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,,轉移至擴增區(qū),。
公司出售的產品:
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肺炎衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒 Chlamydia pneumoniae
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