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試劑本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！

 

操作流程:

收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質粒抽提——>質粒測序——>測序結果分析——>克隆信息輸入數據庫——>質粒實物保存,。

儲存條件：

僅用于科研14℃或－20℃樣品收集,、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激,，收集血液后,，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉離心30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測,，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃，避免反復凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
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使用方法：

注：所有試劑使用前需解凍，混合均勻,，6,000rpm離心數秒后使用,。

1.樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取,，可直接使用,。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl,、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液,、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管),。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶,。

1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區(qū),。 2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物,、陰性質控品和陽性質控品各5 μl，蓋緊管蓋,，于6,000rpm離心10s,，轉移至擴增區(qū)。