詳細(xì)介紹
ELISA 試驗(yàn)時,,注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時,,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時,,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:血小板抗體ELISA檢測試劑盒
英文名稱:platelet antibody
檢測范圍:4.6875μg/ml~150μg/ml
貨號:YS-E98846
性狀:盒狀液體,。
實(shí)驗(yàn)方法:競爭法、一步法,、夾心法,、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究,。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買,!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時,,可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時間延長造成的誤差,;
②加酶試劑后,,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時,使用加樣器加注試劑,,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,,此外,要做到一份樣本一個移液頭,,防止交叉污染,。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時間的條件,;
②用1個小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,,拍板時要垂直,,避免交叉污染,用力不能過猛,,防止抗原抗體復(fù)合物脫離,;
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出,;
③為了洗滌效果好,,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù),;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時,,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試,。
優(yōu)點(diǎn):
1,、*抗體----高效、靈敏,、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,,空白值低,,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強(qiáng)
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,高效
6,、適用于體液,、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人、猴,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、地鼠,、兔、豬,、犬,、牛、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟(jì),、實(shí)惠、可靠,,完善,、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,科研隊(duì)伍,,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴,。
SLC40A1核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體
SSEA3細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體
STMN3階段特異性胚胎表面抗原-3抗體
SSEA4原癌基因18家族STMN3蛋白抗體
SM22 Alpha階段特異性胚胎表面抗原4抗體
phospho-SMAD2(Ser425)細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白抗體
Phospho-Smad1/5 (Ser463 + Ser465)磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體
Phospho-Smad2(Ser465 + Ser467)磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體
Phospho-Smad2(Ser245 + Ser250 + Ser255)磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體
SPHK2磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體
SPAG16鞘氨醇激酶2抗體
SPHK1相關(guān)蛋白16抗體
S100A13鞘氨醇激酶1抗體
SLAMF9S100A13抗體
SCP3CD2F-10抗體
血小板抗體ELISA檢測試劑盒氧化槐果堿 ;Oxysophocarpi CAS號: 26904-64-3 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
冬凌草乙素 CAS號: 52617-37-5 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
焦袂康酸;3-hydroxy-4H-py CAS號: 496-63-9 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
青陽參苷元B CAS號: 106758-54-7 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
羥基酪醇醋酸酯 CAS號: 69039-02-7 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
甜菊雙糖苷;Steviolbioside CAS號: 41093-60-1 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
鉤吻素子;koumine CAS號: 1358-76-5 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
河豚素 CAS號: 4368-28-9 規(guī)格: HPLC≥99%;1mg 訂購|咨詢
蟛蜞菊內(nèi)酯 CAS號: 524-12-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
氧海堿 CAS號: 5574-24-3 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
松果菊苷;Echinacoside CAS號: 82854-37-3 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
鹽酸野靛堿 CAS號: 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg 訂購|咨詢
常山乙素;Febrifugine CAS號: 24159-07-7 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
蘆薈大黃素 CAS號: 481-72-1 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢