詳細(xì)介紹
ELISA 試驗(yàn)時(shí),,注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),,應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
2. 在ELISA中,,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí),。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),,觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:水通道蛋白2ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Aquaporin 2
檢測(cè)范圍:15pg/mL~480pg/mL
貨號(hào):YS-E97330
性狀:盒狀液體。
實(shí)驗(yàn)方法:競(jìng)爭(zhēng)法,、一步法,、夾心法、高敏法等,。
作用范圍:科學(xué)研究,。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個(gè)月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,,請(qǐng)放心購(gòu)買,!
庫(kù)存信息: *√質(zhì)量保證√庫(kù)存充足√
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),,可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差,;
②加酶試劑后,,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),,使用加樣器加注試劑,,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,,盡量使用較低的溫育溫度,、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察,;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,,因此盡量采用水浴,;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),,拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,,用力不能過猛,,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出,;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A,、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,;定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試,。
優(yōu)點(diǎn):
1、*抗體----高效,、靈敏,、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,,空白值低,孔底透明度高
3,、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強(qiáng)
4、購(gòu)買本公司的ELISA試劑盒,,免費(fèi)代測(cè)
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,,高效
6,、適用于體液、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富:人,、猴,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、黃金地鼠、兔,、豬,、犬、牛,、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素,、動(dòng)脈粥樣硬化因子,、趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠,、可靠,,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,,科研隊(duì)伍,,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴,。
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH6.5 MOPSO Buffer,0.2M,pH6.5 常溫保存
250次 植物RNAout Plant RNAOUT 4℃保存
1 mg BCECF AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
50T 芥末PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100mL BES Buffer,0.5M,pH6.0 BES Buffer,0.5M,pH6.0 常溫保存
1.5mL DNA尿素-PAGE上樣液 DNA Urea-PAGE Loading Buffer -20℃保存
25g L- 甲硫氨酸 L-Methionine 室溫密封避光保存
500mL Zymogram Renaturation Buffer,10X Zymogram Renaturation Buffer,10X 常溫保存
500mL Phosphate Buffer,,0.2M, pH7.4 Phosphate Buffer,,0.2M, pH7.4 常溫保存
50T 小反芻獸疫病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pGEX pGEX 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
50次 柱式毛發(fā)DNAout Column Hair DNAOUT 常溫保存(蛋白酶K溶液需要-20℃保存)
50T 副豬嗜血桿菌定量PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
水通道蛋白2ELISA檢測(cè)試劑盒BD測(cè)試包 評(píng)估預(yù)真空蒸汽滅菌器的空氣排除(真空)性能。預(yù)裝配的一次性測(cè)試包,。滅菌后,,解開包裹,取出試... 個(gè)
Bolton 肉湯凍干配套試劑 每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎(chǔ)中,。 10支/盒
Bolton肉湯 用于空腸彎曲桿菌的選擇性增菌,。 100mlX6瓶
Bolton肉湯(含羊血) 用于空腸彎曲桿菌的選擇性增菌。 225mlX6瓶
Bolton肉湯基礎(chǔ) 用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB),,每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑(SR0340) 250g
Bolton肉湯配套試劑 每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎(chǔ)中 10支/盒
B-半乳糖苷ONPG生化鑒定管 細(xì)菌生化鑒定 20支/盒
Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基 用于含微生物樣品的采集,、運(yùn)送和保存,特別是空腸彎曲菌,、霍亂弧菌、副溶血性弧菌、沙門氏菌和志... 100g
Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基(不含瓊脂) 用于含微生物樣品的采集,、運(yùn)送和保存,,特別是空腸彎曲菌、霍亂弧菌,、副溶血性弧菌,、沙門氏菌和志... 100g
CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ) 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的選擇性分離和培養(yǎng) 250g
CIN-1培養(yǎng)基配套試劑 試劑A和試劑B各一支添加于100ml培養(yǎng)基中 10支/盒
CIN-1培養(yǎng)基配套試劑 試劑A和試劑B各一支添加于100ml培養(yǎng)基中 2種*5支/盒