詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時,可分批次操作,,以減少實(shí)驗(yàn)時間延長造成的誤差,;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑,;
③作定量試驗(yàn)時,,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,,此外,,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染,。
2.溫育:
①如有兩種溫度,,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件,;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察,;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,,避免交叉污染,,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離,;
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù),;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A,、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時,,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:免疫抑制性糖蛋白ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Glycodelin
檢測范圍:0.75ng/mL~24ng/mL
貨號:YS-E97146
性狀:盒狀液體,。
實(shí)驗(yàn)方法:競爭法,、一步法、夾心法,、高敏法等,。
作用范圍:科學(xué)研究。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素,;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
優(yōu)點(diǎn):
1,、*抗體----高效,、靈敏、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,空白值低,,孔底透明度高
3,、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,,免費(fèi)代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,,高效
6、適用于體液、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人,、猴,、大鼠,、小鼠,、豚鼠、黃金地鼠,、兔,、豬,、犬、牛,、綿羊,、山羊、鵝,、雞,、蝦、河蟹,、鱸魚,、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子,、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì),、實(shí)惠,、可靠,完善,、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,,科研隊(duì)伍,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴。
ELISA 試驗(yàn)時,,注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時,,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時,,觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 。
0.1mL×10 Rosetta (DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 Rosetta(DE3) Competent Cell -80℃保存
2 ug SD1211- 3 SD1211- 3 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
1個 雜交管(35×200mm) Hybridization Tube 常溫
50T 脊髓灰質(zhì)炎病毒2型PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
100次 動物種屬鑒定PCR Mix 4(28S rDNA D1-D2區(qū)) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pIEXBac-c-EGFP-4 pIEXBac-c-EGFP-4 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
50次 cDNA鏈合成試劑盒 1st-Strand cDNA Synthesis Kit -20℃保存
2 ug pGEX-KG pGEX-KG 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
100次 WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
500次 一管式植物DNAout One-Tube Plant DNAOUT 常溫
2 ug pcDNA5 FRT pcDNA5 FRT 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
1 mg Fura-2,五銨鹽 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
10mg 4’,6- 二脒基 -2- 苯基吲哚 DAPI -20℃避光保存
免疫抑制性糖蛋白ELISA檢測試劑盒500mL Blotto-Tween in PBS Blotto-Tween in PBS 常溫保存
2 ug pQE-32 pQE-32 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
200U 9°Nm DNA聚合酶 9°Nm DNA Polymerase -20℃保存
0.5mL dNTP溶液(標(biāo)記) dNTP for Labeling -20℃保存
2 ug pSC194 pSC194 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
1mL 衣霉素溶液,5mg/mL Tunicamycin Solution 4℃避光保存
2000 U 限制性內(nèi)切酶ApaI Restriction Endonuclease -20℃保存
1瓶 MuM-2C細(xì)胞株 MuM-2C 低溫運(yùn)輸和保存
2 ug pCMV6 entry pCMV6 entry 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pEGFP-Mem pEGFP-Mem 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
250次 綠如藍(lán)蛋白染液 One-Step PAGEblue 常溫保存
150次 DNA 修復(fù)混合液 DNA Repair Mix -20℃保存
500U RNase抑制劑(豬源)