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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 產(chǎn)品名稱 | 霍亂弧菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
詳細(xì)介紹
服務(wù)流程：
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
霍亂弧菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 50次 |
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增,；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝,；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè),；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒,。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保7min,。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
相關(guān)產(chǎn)品
同艾特韋病毒PCR檢測(cè)試劑盒Egtved Virus(VHSV)RTPCR
查菲埃立克體PCR檢測(cè)試劑盒Ehrlichia chaffeensisPCR
弗格森埃立克體PCR檢測(cè)試劑盒Ehrlichia fergusoniiPCR
里氏埃里希氏體PCR檢測(cè)試劑盒Ehrlichia risticiiPCR
反芻獸埃立克體PCR檢測(cè)試劑盒Ehrlichia ruminaiumPCR
實(shí)驗(yàn)過程：
一,、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有,，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì),。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM
5．Taq酶
二,、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min,。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三,、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行,。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響,。一般而言,，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好,。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染,。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌,。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意,，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌,。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
耦合因子6(CF6)重組蛋白英文名稱：Recombina Coupling Factor 6 (CF6)物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)
乙醛氧化mei1(AOX1)重組蛋白英文名稱：Recombina Aldehyde Oxidase 1 (AOX1)物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)
鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPmeiβ4肽(ATP1b4)重組蛋白英文名稱：Recombina ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4)物種：Homo sapiens (Human,，人)
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NADH脫氫mei1(ND1)重組蛋白英文名稱：Recombina NADH Dehydrogenase 1 (ND1)物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)
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環(huán)氧化合物水解mei4(EPHX4)重組蛋白英文名稱：Recombina Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)
γ-分泌激活蛋白(gSAP)重組蛋白英文名稱：Recombina Gamma-Secretase Activating Protein (gSAP)物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
透明質(zhì)suan氨基葡糖苷mei1(HYAL1)重組蛋白英文名稱：Recombina Hyaluronoglucosaminidase 1 (HYAL1)物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)
11-β-羥基類固醇脫氫mei3(HSD11b3)重組蛋白英文名稱：Recombina 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD11b3)物種：Homo sapiens (Human,，人)
霍亂弧菌PCR檢測(cè)試劑盒脯氨酰4-羥化meiα多肽Ⅱ(P4Hα2)ELISA試劑盒Human Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide II(P4Ha2)ELISA Kit
脯氨suan脫氫mei2(PRODH2)ELISA試劑盒Human Proline Dehydrogenase 2(PRODH2)ELISA Kit
脯氨suan豐富蛋白4(PRR4)ELISA試劑盒Human Proline Rich Protein 4, Lacrimal(PRR4)ELISA Kit
脯氨suan/絲氨suan豐富卷曲螺旋蛋白1(PSRC1)ELISA試劑盒Human Proline/Serine Rich Coiled Coil protein 1(PSRC1)ELISA Kit
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