詳細(xì)介紹
硝酸纖維素薄膜產(chǎn)品概述:
硝酸纖維素薄膜
英文名稱(chēng):NC;Nitroate cellulose sheets
其他名稱(chēng):硝酸纖維素膜
規(guī)格:30×3cm/卷
性狀(以下信息僅供參考):硝纖膜比較脆,,又容易卷,,操作要小心,不適合用于需要多次重復(fù)清洗的用途,。選擇硝纖膜時(shí)要注意的是選擇合適的孔徑,,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔徑的膜,小于20KD的話建議選擇0.2um的,,如果小于7KD的話選擇0.1um的膜,。另外還要注意選擇純的NC膜——混有含醋酸纖維(CM)的NC膜結(jié)合力會(huì)有所降低。由于NC膜上結(jié)合的蛋白會(huì)因?yàn)橐恍┤ノ蹌┒淮?,因此在封閉時(shí)使用較溫和的Tween20,,而且濃度不要超過(guò)0.3%
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途,。(以下用途僅供參考)硝酸纖維素膜是蛋白印跡廣泛使用的轉(zhuǎn)移介質(zhì),,對(duì)蛋白有很強(qiáng)的結(jié)合能力,而且適用于各種顯色方法,,包括同位素,,化學(xué)發(fā)光(Luminol類(lèi))、常規(guī)顯色,、染色和熒光顯色,;背景低,信噪比高,。NC膜的使用也很簡(jiǎn)便,,比如不需要甲醛預(yù)處理,,只要在無(wú)離子水面浸潤(rùn)排出膜內(nèi)氣泡,再在電泳緩沖液中平衡幾分鐘就可以了,;比如NC膜很容易封閉,,也不需要特別嚴(yán)謹(jǐn)?shù)那逑礂l件。轉(zhuǎn)移到NC膜上的蛋白在合適的條件下可以穩(wěn)定保存很長(zhǎng)時(shí)間
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公司優(yōu)勢(shì):
我司為專(zhuān)業(yè)的生物試劑公司,,不僅代理各種知名的國(guó)際國(guó)內(nèi)品牌,,還注重自身的和,具備一定的專(zhuān)業(yè)背景和實(shí)力基礎(chǔ),。我司成立較早,,在殘酷的競(jìng)爭(zhēng)環(huán)境中屹立至今,這與我們誠(chéng)信至上以及注重專(zhuān)業(yè)實(shí)力的信念是離不開(kāi)的,。經(jīng)過(guò)多年的摸爬滾打,,我司擁有屬于自己的營(yíng)銷(xiāo)理念和方法。我司定位明確,,客戶(hù)精準(zhǔn),,眼光高遠(yuǎn),立足于當(dāng)下前沿性的科研領(lǐng)域,,提供當(dāng)前科研所需的試劑以及耗材產(chǎn)品,,客戶(hù)遍布各大高校、科研院所以及其他性的企業(yè),。關(guān)于硝酸纖維素薄膜訂購(gòu)事宜以及合作詳情可點(diǎn)擊這里咨詢(xún)我們,。
Western Blot操作方法:
1.培養(yǎng)細(xì)胞蛋白質(zhì)樣品的制備:
1)在合適的鹽濃度下,應(yīng)保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復(fù)性,。
2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,,破壞所有非共價(jià)結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物和共價(jià)鍵二硫鍵,使其形成一個(gè)各自多肽的溶液,。
3)盡量去除核酸,,多糖,脂類(lèi)等干擾分子,。
4)防止蛋白質(zhì)在樣品處理過(guò)程中的人為的修飾,,制備過(guò)程應(yīng)在低溫下進(jìn)行,以避免細(xì)胞破碎釋放出的各種酶類(lèi)的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
5)樣品建議分裝成合適的量,,然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存,,但要注意不要反復(fù)凍融。
2.組織樣品的制備:
手術(shù)切除的組織塊迅速置于預(yù)冷的0.95生理鹽水中,,漂洗數(shù)次,,以清潔表面的血跡,將組織稱(chēng)量后切成幾個(gè)較小的組織塊放入機(jī)戒組織勻漿器中,,按組織凈重,,裂解液=1:10的比例,,加入相應(yīng)體積的裂解液進(jìn)行勻漿,,離心收集上清(如有粘稠物可超聲處理,,具體方法見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)的樣品制備,也可以冷凍干燥降解核酸后,,將凍干的蛋白質(zhì)樣品溶解在適當(dāng)?shù)纳蠘?buffer中,,混勻后靜置3小時(shí)使樣品中的蛋白質(zhì)充分的溶解,有5分鐘即可,,4度離心收集,。)加入Laemmli樣品緩沖液(視蛋白樣品濃度,以1:1或1:2的比例混合)強(qiáng)力混勻,,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,,10000g離心10分鐘,,取上清液,,將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中,至此,,電泳樣品已準(zhǔn)備就緒(樣品即可立即使用也可也可以分裝凍存,,-20℃存放的樣品可穩(wěn)定保持?jǐn)?shù)月。)
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