詳細(xì)介紹
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),,我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式,、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同,。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),,本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì)),。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,,本公司不接受已溶解的引物/探針,。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量,、反轉(zhuǎn)錄,、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析,。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑,、擴(kuò)增曲線,、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
48T 0.1PCR管 | YS-01P6344 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a,、競(jìng)爭(zhēng)法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板,。在同一反應(yīng)管中,待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記),。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,,競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測(cè)模板不被酶切,,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,,分別測(cè)定熒光強(qiáng)度,,根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù)。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,,下游引物不標(biāo)記,。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增,。在PCR產(chǎn)物中,,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長(zhǎng)度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,,分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度,,以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板。
c,、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,,最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),,作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的。
使用方法:
一,、樣品采集:
1,、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2,、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,,立即混勻,。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢,。
4,、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢,。
二,、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照,。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,,分別為 7,6,,5,,4,3,,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同),。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用,。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
1,2,3,4,5,6-六氯環(huán)己烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品磷三苯酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒
1,2,3,4,5,6-六氯環(huán)己烷 97%磷三苯酯 CP豬25羥基維生D3(25 HVD3)免疫試劑盒
DL-乳鋰 97%磷三苯酯 98%豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒
溶菌,雞蛋白 40000U/mg磷酚酯 99%豬17羥孕酮(17-OHP)免疫試劑盒
亞麻 分析標(biāo)準(zhǔn)品 ,≥99% (GC)環(huán)胞霉A 98%豬1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒
雙(基硅烷基)氨基鋰 95%0.95小鼠ELISA試劑盒
石膽 98%對(duì)氨基水楊 98%小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒
水楊鋰 98%L-氨基 98%小鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒
水楊鋰 99.99% DL-氨基 98%小鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒
L-乳 分析標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)氨基水楊鈉 98%小鼠組織蛋白去乙?;?(Hdac2/Yy1bp)免疫試劑盒
L-乳 98%4-羥基異亮氨 95%小鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒
2-甲氧基吡啶基-3- 97%皂 BR,10~25%小鼠組蛋白脫乙酰(HDAC1)免疫試劑盒
三磺甲酯 97%皂 Sapogenin 20-35 %小鼠組蛋白去乙?;?(HDAC4)免疫試劑盒
3-甲基膽蒽標(biāo)準(zhǔn)溶液100 ng/μl,溶劑:乙熊果 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%小鼠組蛋白去乙?;?(HDAC3)免疫試劑盒
滅蟻靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品熊果 93%小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
創(chuàng)傷弧菌核酸檢測(cè)試劑盒48T 0.1PCR管胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒--動(dòng)物,,人二苯基次膦酰氯防御α1/3抗體
生長(zhǎng)激釋放多肽(GHRP) ELISA試劑盒--動(dòng)物,人5-溴-2-氯苯甲ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體
人激肽釋放11(KLK 11)ELISA試劑盒, KLK 11 ELISA kit5-溴-2-氯苯甲植物延長(zhǎng)蛋白(擬南芥)
小鼠基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒,氯化銥(III) 水合物A-Raf抗體
小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒,4-氨基-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶磷化A-Raf抗體
小鼠T活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒,4-氨基-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶紅腺脫氨3抗體
小鼠狀腺原氨(T3)ELISA試劑盒,4-(氯甲酰)丁甲酯雄激結(jié)合蛋白抗體
腺病抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒--動(dòng)物,,人4-(氯甲酰)丁甲酯肝再生增強(qiáng)因子抗體