詳細介紹
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,,可分批次操作,,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,,用吸水紙吸干孔外試劑,;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,,并經(jīng)常校正其準確性,,此外,要做到一份樣本一個移液頭,,防止交叉污染,。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時間的條件,;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,,拍板時要垂直,,避免交叉污染,用力不能過猛,,防止抗原抗體復(fù)合物脫離,;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出,;
③為了洗滌效果好,,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù),;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,,酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試,。
詳細參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:綠膿桿菌外毒素AELISA檢測試劑盒
英文名稱:PEA
檢測范圍:12.5pg/mL~400pg/mL
貨號:YS-E97771
性狀:盒狀液體,。
實驗方法:競爭法、一步法,、夾心法,、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究,。
樣品形式:血清血漿細胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買,!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素,;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,,必能得出準確的實驗結(jié)果,,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
優(yōu)點:
1,、*抗體----高效,、靈敏、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,空白值低,,孔底透明度高
3,、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,,高效
6、適用于體液,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠、地鼠,、兔,、豬、犬,、牛,、綿羊、山羊,、鵝,、雞、蝦,、河蟹,、鱸魚,、斑馬魚等
8、可檢測指標齊全:炎癥因子,、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟,、實惠、可靠,,完善,、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,,良好的實驗設(shè)備,、準確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴,。
ELISA 試驗時,,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
2. 在ELISA中,,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,,在同一實驗條件下進行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,,觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。
茶黃素-3,3'-雙沒食子酸 Theaflavine-3,3'-digallate (TFBG) 33377-72-9 20mg HPLC≥98%
茶黃素-3'-沒食子酸酯 Theaflavin-3'-Gallate (TF-3'-G) 28543-07-9 20mg HPLC≥98%
茶黃素-3-沒食子酸酯 Theaflavin-3-Gallate(TF-3-G) 30462-34-1 20mg HPLC≥98%
茶堿 Theophylline 58-55-9 20mg HPLC≥98%
查斯曼林,;查斯曼寧堿 Chasmanine 20mg HPLC≥98%
柴胡對照藥材 BUPLEURIRADIX 1g 鑒別
柴胡皂苷A;柴胡皂甙A Saikosaponin A 20736-09-8 20mg HPLC≥98%
柴胡皂苷B,;柴胡皂甙B Saikosaponin B 20mg UV≥98%
柴胡皂苷B1,;柴胡皂甙B1 Saikosaponin B1 58558-08-0 20mg HPLC≥98%
綠膿桿菌外毒素AELISA檢測試劑盒人 TECTB 基因全長ORF克隆
人 OR2S2 基因全長ORF克隆
人 OR51B2 基因全長ORF克隆
人 AFMID 基因全長ORF克隆
人 ATP1B2 基因全長ORF克隆
人 AGBL4 基因全長ORF克隆
人 NPTN 基因全長ORF克隆
人 RASL11A 基因全長ORF克隆
人 IL31RA 基因全長ORF克隆