ELISA 試驗時,，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,，待檢樣品應作一式二份,，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應,，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中,，進行各項實驗條件的選擇是很重要的,，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應,，觀察其顯色反應是否均一性,，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時,。蛋白質包被適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1,、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時,，觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1～10μg／ml,。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）,。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應,，而本身無色,。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護,。有條件者應使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,，應加入強酸或強堿以終止反應,。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,，尤其是H2O2在臨用前加入 。

詳細參考數(shù)值：
產(chǎn)品名稱：維生素K1ELISA檢測試劑盒
英文名稱：Vitamin K1
檢測范圍：0.25ng/mL~8ng/mL
貨號：YS-E97412
性狀：盒狀液體,。
實驗方法：競爭法,、一步法、夾心法,、高敏法等,。
作用范圍：科學研究。
樣品形式：血清血漿細胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質期：6個月,，本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,，請放心購買！
庫存信息： *√質量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素,；
②試劑因素,；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,，必能得出準確的實驗結果,，可提供免費技術咨詢服務！

注意事項：
1加樣：
①實驗樣本過多時,，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差,；
②加酶試劑后,，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時,，使用加樣器加注試劑,，并經(jīng)常校正其準確性，此外,，要做到一份樣本一個移液頭,，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度,，盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察,；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,，因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板：
①手工洗板時,，拍板時要垂直,，避免交叉污染，用力不能過猛,，防止抗原抗體復合物脫離,；
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出,；
③為了洗滌效果好,，實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,，或適當增加洗板的次數(shù),；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,，則提供的底物為A和B兩瓶應用液,；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,，但A、B液應盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定：
讀取結果要在15-30 min內完成,，定性測定用肉眼判讀試驗結果時，反應板應水平距離白色背景10-15 cm,；定量測定時用酶標儀讀取結果,，酶標儀不應置于陽光或強光照射下，需先預熱15-30 min再進行測試,。
優(yōu)點：
1,、*抗體----高效、靈敏,、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻，吸附性好,，空白值低,，孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復性高,，可靠性強
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,，免費代測
5、技術服務要求：專業(yè),，規(guī)范,，高效
6、適用于體液,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富：人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠、黃金地鼠,、兔,、豬、犬,、牛,、綿羊、山羊,、鵝,、雞、蝦,、河蟹,、鱸魚、斑馬魚等
8,、可檢測指標齊全：炎癥因子,、血管生成素、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子、生長因子基質金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟、實惠,、可靠,，完善、穩(wěn)定的實驗體系,，科研隊伍,，良好的實驗設備,、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴,。

250mL Potassium Phosphate Solution,，0.5M, pH7.0   Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.0   常溫保存

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