詳細(xì)介紹
ELISA 試驗(yàn)時(shí),,注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:胸腺素β4樣蛋白3ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Thymosin beta-4-like protein 3
檢測范圍:3.125ng/mL~100ng/mL
貨號:YS-E97496
性狀:盒狀液體,。
實(shí)驗(yàn)方法:競爭法,、一步法、夾心法,、高敏法等,。
作用范圍:科學(xué)研究,。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,,請放心購買,!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),,可分批次操作,,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,,用吸水紙吸干孔外試劑,;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,,此外,要做到一份樣本一個移液頭,,防止交叉污染,。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時(shí)間的條件,;
②用1個小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時(shí),,拍板時(shí)要垂直,,避免交叉污染,用力不能過猛,,防止抗原抗體復(fù)合物脫離,;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出,;
③為了洗滌效果好,,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù),;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,,但A,、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
優(yōu)點(diǎn):
1,、*抗體----高效,、靈敏、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,空白值低,,孔底透明度高
3,、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,,免費(fèi)代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,,高效
6、適用于體液,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠,、黃金地鼠、兔,、豬,、犬、牛,、綿羊,、山羊、鵝,、雞,、蝦、河蟹,、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子,、血管生成素、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟(jì),、實(shí)惠、可靠,,完善,、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,科研隊(duì)伍,,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴,。
2 ug pAdTrack pAdTrack 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
100U Vent DNA 聚合酶 Vent (exo-)DNA Polymerase -20℃保存
250mL Yeast Lysis Buffer (for mini prep) Yeast Lysis Buffer (for mini prep) 常溫保存
50T 破傷風(fēng)桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1瓶 RSC96細(xì)胞株 RSC96 低溫運(yùn)輸和保存
1mL 長效期SDS-PAGE上樣液 Stable SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存
50T 人白血病μ-BCR-ABL融合基因PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
25g 楊酸 Salicylic Acid 室溫避光保存
100µL 山羊抗小鼠IgG(H+L), 堿性磷酸酶標(biāo)記 Goat Anti-Mouse IgG(H+L),AP Conjugate -20℃保存
1 mg NS-2028(sGC抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
1000U T4 RNA連接酶 1(T4 RNA Ligase 1) T4 RNA Ligase 1 -20℃保存
1瓶 Cyc-Tag(S49)細(xì)胞株 Cyc-Tag(S49) 低溫運(yùn)輸和保存
50fpu 人重組AP1 (c-Jun) rhAP1 (c-Jun) 4℃保存
胸腺素β4樣蛋白3ELISA檢測試劑盒大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA Kit 異鉤藤堿(5088 Ponceau 2R(麗春紅-2R)
大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit 異甘草素(5496 Potassium permanga nate(高錳酸鉀)
大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA Kit 異補(bǔ)骨脂素(5 56 potassium alum(十二水硫酸鋁鉀,、鉀明礬、白礬,、鉀明礬)
大鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA Kit 異阿魏酸; -羥基-4-甲氧基肉桂酸(55 9 Potassium dichromate(紅礬鉀,、重鉻酸鉀)
大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA Kit 乙酰羽扇豆醇酯(5912 Resorcinol(1,3-苯二酚、1,3-二羥基苯,、間苯二酚)
大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA Kit 乙酰苯胺成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(4044 Rose bengal(玫瑰紅,、孟加拉紅,、孟加拉玫瑰紅B、虎紅鈉鹽,、虎紅)
大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA Kit 乙水楊胺(100 94 Rubeanic acid(紅氨酸)
大鼠雄激素(andRogen)ELISA Kit 乙羥茶堿(100215 Sodium metabisulfite(偏亞硫酸鈉,、二亞硫酸鈉、重亞硫酸鈉,、焦亞硫酸鈉)
大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA Kit 乙基香蘭素(1560 Soluble blue(溶性藍(lán))
大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BRdU)ELISA Kit *泊苷(588 Sudan Ⅱ(蘇丹Ⅱ)