詳細(xì)介紹
ELISA 試驗時,,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
2. 在ELISA中,,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,,在同一實驗條件下進行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:骨成型蛋白8AELISA檢測試劑盒
英文名稱:Bone morphogenetic protein 8A
檢測范圍:6.25pg/ml~200pg/ml
貨號:YS-E98190
性狀:盒狀液體。
實驗方法:競爭法,、一步法,、夾心法、高敏法等,。
作用范圍:科學(xué)研究,。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,,請放心購買,!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素,。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù),!
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差,;
②加酶試劑后,,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,,使用加樣器加注試劑,,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,,要做到一份樣本一個移液頭,,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,,盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察,;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,,因此盡量采用水浴,;
3.洗板:
①手工洗板時,,拍板時要垂直,避免交叉污染,,用力不能過猛,,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出,;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試,。
優(yōu)點:
1,、*抗體----高效、靈敏,、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,,空白值低,孔底透明度高
3,、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,,免費代測
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,,高效
6,、適用于體液、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人,、猴,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、地鼠、兔,、豬,、犬,、牛、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8,、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟、實惠,、可靠,,完善、穩(wěn)定的實驗體系,,科研隊伍,,良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴,。
Beta-casein軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體 HIT ELISA Kit 人抗肝素PF4復(fù)合物抗體 /HIT抗體 (HIT)ELISA試劑盒
c21orf63 β-酪蛋白抗體 LKM ELISA Kit 人抗肝腎微粒體抗體 (LKM)ELISA試劑盒
C4orf5221號染色體開放閱讀框63抗體 SLA ELISA Kit 人抗肝可溶性抗原抗體 (SLA)ELISA試劑盒
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Cullin 34號染色體開放閱讀框40抗體 ACAST-DⅣ ELISA Kit 人抗鈣蛋白酶抑素抗體 (ACAST-DⅣ)ELISA試劑盒
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CHMP1A卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白106抗體 PM-Scl/PM-1 ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體 (PM-Scl/PM-1)ELISA試劑盒
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CDC20B葉綠體伴侶蛋白抗體 (蘋果)ssDNA ELISA Kit 人抗單鏈DNA抗體 /變性DNA抗體 (ssDNA)ELISA試劑盒
Cell division control protein septin D1細(xì)胞分裂周期蛋白20B抗體 AMA ELISA Kit 人抗單核細(xì)胞抗體 (AMA)ELISA試劑盒
ccnb1ip1細(xì)胞周期調(diào)控蛋白D1抗體 Surv ELISA Kit 人抗存活素抗體 /生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒
Cdc14A周期蛋白B1結(jié)合蛋白1抗體 Anti FSH Ab ELISA Kit 人抗促卵泡素抗體 (Anti FSH Ab)ELISA試劑盒
C7orf12細(xì)胞周期調(diào)控因子14A抗體 TRAb ELISA Kit 人抗促甲狀腺素受體抗體 (TRAb)ELISA試劑盒
CA XI第七號染色體開放閱讀框12抗體 C1q ELISA Kit 人抗補體1q抗體 (C1q)ELISA試劑盒
骨成型蛋白8AELISA檢測試劑盒Cary-Blair Transport Medium
IFNA5 ProteinMouse重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標(biāo)簽)
車前草 英文名稱:Plantain 規(guī)格:1g 保存:-20℃,避光
TNFRSF14 ProteinHuman重組人 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL12B ProteinHuman重組人 IL12B / P40 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CDH13 ProteinRat重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
乳酸桿菌選擇性瓊脂250g用于乳酸桿菌檢測和分離培養(yǎng)
改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250g
IL6ST ProteinHuman重組人 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
枸櫞酸鉍雷尼替丁 英文名稱:Ranitidine bismuth citrate 規(guī)格:100mg 保存:-20℃,,避光
Cary-Blair運送培養(yǎng)基管1支加入Cary-Blair運送培養(yǎng)基,,用于運輸樣品
槐米 英文名稱:Sophora japonica 規(guī)格:2g 保存:-20℃,避光
GAM Agar,Modified
IFNA8 ProteinCynomolgus重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)