淋巴細胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒PCR檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：SAFBSAFB蛋白抗體KIAA0513KIAA0513蛋白抗體Histone H2B (Acetyl K23)乙?；M蛋白H2B (Lys23)鼠單克隆抗體應(yīng)用類型: Other英文名稱: MLKL應(yīng)用類型: Phosphorylated英文名稱: GAPDH-Loading Corol

實驗外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片,、SNP檢測、DNA甲基化檢測,、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達譜芯片,、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取,、RT-PCR,、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip  EMSA,、CHIP,、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色,、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細胞分選

7.代謝組學(xué)：GC-MS,、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型：原代細胞,、細胞模型,、動物模型構(gòu)建

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2,、 標準品（凍干品）： 2瓶,，請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘,，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋）,，分別配制成200 U/L,，100 U/L，50 U/L,，25 U/L,，12.5 U/L，6.25 U/L,，3.12 U/L,，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,，混勻即可,，其余濃度以此類推,。

3,、 樣品稀釋液：1×20ml。

4,、 檢測稀釋液A：1×10ml,。

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注意事項：

1.整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,，各區(qū)實驗服,、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,，不能混用,；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作,；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。

3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰,、陽性對照。

4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時離心,。

5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),，并單獨存放。

6.為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。

7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置,；不同批號試劑不能混用,。

8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None,。

9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄,。

PCR實驗步驟：

①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其溶解,。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。

③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,，測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,！

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