詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
羅湖病毒(TiLV)核酸檢測(cè)試劑盒 | 50次 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),,無(wú)非特異性擴(kuò)增,;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝,;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè),;
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
相關(guān)產(chǎn)品
H5-H7-H9與新城疫病毒(NDV)四重核suan檢測(cè)試劑盒
病毒H3N2(AIV-H3N2)核suan檢測(cè)試劑盒
豬瘟病毒/豬藍(lán)耳病病毒通用型/高致病性豬藍(lán)耳病病毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)核suan檢測(cè)試劑盒科研用
豬藍(lán)耳病病毒通用型/高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-U/PRRSV-M)核suan檢測(cè)試劑盒
豬瘟病毒/豬藍(lán)耳病病毒通用型(CSFV/PRRSV-U)核suan檢測(cè)試劑盒科研用
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一,、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì),。因此,,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
三,、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室,。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響,。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,,純化的方法越簡(jiǎn)單越好,。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套,。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,,試驗(yàn)一下是否滿意,,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性,。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,,并且要充分混勻,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人抗凝脂(PL)抗體(IgG)ELISA試劑盒Human ai-phospholipid(PL)aibody(IgG)ELISA kit
人抗su抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒Human ai-prothrombins aibodies,aPT1/aPT2 ELISA Kit
人抗mei-磷脂酰絲氨suan復(fù)合物(RTH-PS)抗體ELISA試劑盒Human ai-prothrombin-phosphatidylserine complex(RTH-PS)aibody ELISA kit
人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA試劑盒Human Ai-Saccharomyces cerevisiae aibody,ASCA ELISA Kit
人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒Human irinsic factor aibody,IFA ELISA Kit
人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒Human ai-brain tissue aibody,ABAb ELISA Kit
人抗腦皮質(zhì)(CC)自身抗體ELISA試劑盒Human ai cerebral cortex(CC)autoaibody ELISA kit
人抗苗勒管激su(AMH)ELISA試劑盒Human ai-Mullerian hormone, AMH ELISA Kit
人抗麥角蛋白(Gliadin)抗體(IgA)ELISA試劑盒Human ai-Gliadin aibody IgA ELISA Kit
人抗麥膠蛋白抗體(IgG)ELISA試劑盒Human ai-gliadin aibody IgG ELISA Kit
羅湖病毒(TiLV)核酸檢測(cè)試劑盒轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)ELISA試劑盒Mouse Transcription factor 20(TCF20)ELISA Kit
轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)ELISA試劑盒Mouse Activating Transcription Factor 6(ATF6)ELISA Kit
轉(zhuǎn)錄激活因子5(ATF5)ELISA試劑盒Mouse Activating Transcription Factor 5(ATF5)ELISA Kit
轉(zhuǎn)錄激活因子3(ATF3)ELISA試劑盒Mouse Activating Transcription Factor 3(ATF3)ELISA Kit