詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T | YS-01P6711 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a,、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴(kuò)增(其中一個引物為熒光標(biāo)記),。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù),。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時,,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增,。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板,。
c,、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,也可實現(xiàn)定量檢測目的,。
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),,我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線,;
商定服務(wù)收費、付款方式,、服務(wù)期限等,,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),,本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),,可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計),。如果由您自己提供,,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提,、RNA定量,、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增,、數(shù)據(jù)分析,。
提供實驗報告,包括實驗過程,、所用儀器試劑,、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等,。
使用方法:
一,、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行,。
2,、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,,立即混勻,。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢,。
4,、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢,。
二,、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照,。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,,6,,5,4,,3,,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,,下同),。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。
N-叔丁氧羰基-L-天冬氨 4-叔丁酯二環(huán)己鹽 98%5-溴-2-糖 98%大鼠谷氨脫氫(GDH/GLDH)免疫試劑盒
N-叔丁氧羰基-D-天冬氨 1-芐酯 BR5-溴-4--3-吲哚基磷酯對甲鹽 for molecular biology, ≥大鼠谷氨免疫試劑盒
S-乙?;?N-叔丁氧羰基-L-半胱氨 96%并(a)蒽 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒
N-叔丁氧羰基-S-[(乙酰氨基)甲基]-L-半胱氨 4-酯 98%還原輔Ⅱ四鈉鹽 98%大鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira IgG)免疫試劑盒
Boc-S-芐基-L-半光氨 99% α-糖 98%,anomer ca 15%大鼠睪酮(T)免疫試劑盒
N-叔丁氧羰基-S-(4-甲基)-L-半胱氨 96%纖維二糖 98%大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒
BOC-S-(4-METHOXYBENZYL)-L-半胱氨 98% 纖維二糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠高敏狀腺原氨(u-T3)免疫試劑盒
N-Boc-N'-三甲基-L-谷氨酰;N-叔丁氧羰基-N'-三甲基-L-谷氨2--4--alpha-L-巖藻糖 98%大鼠高敏甲狀腺(u-T4)免疫試劑盒
N-叔丁氧羰基-N'-(9-氧雜蒽基)-L-谷氨酰 97%甜 99%大鼠高密度脂蛋白膽固(HDL-C)免疫試劑盒
2-叔丁氧羰基氨基-4-氨?;?4-酯 98%十二烷基-β-D-麥芽糖 99%大鼠高密度脂蛋白3(HDL3)免疫試劑盒
4-叔丁氧羰基氨基-4-氨?;? 98%2-脫氧-D-核糖 98%大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)免疫試劑盒
D-叔丁氧羰基-L-谷氨α芐脂 98%二硫蘇糖 用于分子生物學(xué), ≥99%大鼠高密度脂蛋白(HDL)免疫試劑盒
Boc-甘氨-N-羥基琥珀酰亞酯 99%三磷脫氧胞鈉鹽 98%大鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)免疫試劑盒
N-Boc-N'-芐氧甲基-L-組氨 98%N,N'-二異基碳二酰亞 98%大鼠高半胱氨(Hcy)免疫試劑盒
N-(叔丁氧羰基)-1-(2,4-二基)-L-組氨 98%1,4-丁二雙鹽鹽 99%大鼠肝脂(HL)免疫試劑盒
動物組織基因組DNA快速提取試劑盒48T5-O-甲基維斯阿米醇 4'-O-beta-Glucopyranosyl-5-O-Methylv3-羥基己乙酯8號染色體開放閱讀框58抗體
D-甘露糖鹽鹽3-羥基己乙酯8號染色體開放閱讀框74抗體
瓊脂糖3:1HRB2--4-甲基-5-硝基吡啶8號染色體開放閱讀框76抗體
4-溴聯(lián)2--4-甲基-5-硝基吡啶8號染色體開放閱讀框77抗體
偶氮胂Ⅲ2--4-甲基-5-硝基吡啶6號染色體開放閱讀框97抗體
人巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒,2--4-硝基吡啶補(bǔ)體C7抗體
人白介13(IL-13)ELISA試劑盒,IL-13 ELISA kit2--4-硝基吡啶7號染色體開放閱讀框10抗體
人CD30分子(CD30)ELISA試劑盒,CD30 ELISA kit2--4-硝基吡啶7號染色體開放閱讀框45抗體