詳細介紹
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱,、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線,;
商定服務(wù)收費,、付款方式、服務(wù)期限等,,并簽定技術(shù)服務(wù)合同,。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),,可以由您自己提供,,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提,、RNA定量,、反轉(zhuǎn)錄,、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析,。
提供實驗報告,,包括實驗過程、所用儀器試劑,、擴增曲線,、標準曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T | YS-01P6329 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a,、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記),。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù),。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物,,內(nèi)標用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標記,下游引物不標記,。在模板擴增的同時,,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板,。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標記引物,,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,,再加入抗di高辛或酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,,也可實現(xiàn)定量檢測目的,。
使用方法:
一,、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行,。
2,、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,,立即混勻,。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢,。
4,、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢,。
二,、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照,。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,,6,,5,4,,3,,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,,下同),。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。
5. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用
6. 換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
膽固 99%乙二 >99%(GC)豬胃泌調(diào)節(jié)(OXM)免疫試劑盒
3-氯酚 分析標準品三乙烯四 AR,70%豬偽狂犬病(PRV)抗體(IgG)免疫試劑盒
皮質(zhì)甾酮 98%四乙烯五 95%豬維生D(VD)免疫試劑盒
硫化亞銅 99%四乙烯五 CP,90.0% 豬褪黑(MT)免疫試劑盒
天青石藍 97%鄰甲酚 99%豬透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
α-氯糖 98%,anomer ca 15%對甲酚 98%豬鐵蛋白(FE)免疫試劑盒
分析標準品對甲酚 99%豬糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
屈 分析標準品對甲酚 Standard for GC,,≥99.7% (GC) 豬胎球蛋白A 免疫試劑盒
香芹酚 99%對酚標準溶液1059mg/L,溶劑:甲苯豬胎盤生長因子(PGF)免疫試劑盒
莰烯 分析標準品對甲酚 分析標準品豬髓磷脂性蛋白(MBP)免疫試劑盒
莰烯 95%利血平 ≥99.0% (HPLC)豬髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒
(+/-)-兒茶精 分析標準品硫長春 分析標準品,,≥97%(HPLC)豬水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒
(+/-)-兒茶精 96%文多靈 分析標準品,≥98%豬水通道蛋白1(AQP-1)免疫試劑盒
(+)-兒茶 分析標準品,,>98%文多靈 ≥98.0% (HPLC)豬雙氫睪酮(DHT)免疫試劑盒
(+)-兒茶 98%硫長春新 98%豬輸血傳播病/辛型肝炎病抗體(IgG)免疫試劑盒
霍亂弧菌O1型核酸檢測試劑盒48T小鼠新生甲狀腺(NN-T4)ELISA試劑盒,(環(huán)基)三苯基溴化膦腺A1A受體抗體
透明質(zhì)(HA)ELISA試劑盒--動物,,人2-甲基-4-溴苯甲芳基硫酯B抗體
軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒--動物,人2-甲基-4-溴苯甲γ氨基丁轉(zhuǎn)氨抗體
血栓B2(TXB2)ELISA試劑盒--動物,,人1,3,5-三(9-咔唑基)苯(以升華法純化)共濟失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體
皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒--動物,,人3-氯-2-吡啶腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換
雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒--動物,人3-氯-2-吡啶芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體
小鼠白介-5(IL-5)ELISA試劑盒,3-氯-2-吡啶AlkB同源蛋白8抗體
小鼠正常T表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒,3-氯-2-吡啶ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體