詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | YS-01P6430 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,,分別測定熒光強度,,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,,下游引物不標(biāo)記,。在模板擴增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴增,。在PCR產(chǎn)物中,,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,,分別測定其熒光強度,,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c,、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,,最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標(biāo),,作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱,、序列等信息),,我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費,、付款方式,、服務(wù)期限等,,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),,本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),,可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計),。如果由您自己提供,,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針,。
我們進行RNA抽提,、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄,、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析,。
提供實驗報告,,包括實驗過程、所用儀器試劑,、擴增曲線,、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
使用方法:
一,、樣品采集:
1,、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2,、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻,。
3,、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4,、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物,、粘液膿血送檢。
二,、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照,。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,,分別為 7,,6,5,,4,,3,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
5. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。
二 98%4- 99%兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)免疫試劑盒
3,4,5-氧基肉桂 99%2--4-(三甲基) 97%兔抗糖蛋白抗體(GP)免疫試劑盒
二基(2,,4,,6-酰基)氧化膦 97%3-羥 97%兔抗平滑肌抗體(ASMA) 免疫試劑盒
槲皮,二水 97%2-羥基 97%兔抗III(SERPINC1)免疫試劑盒
槲皮 分析標(biāo)準(zhǔn)品,,≥98.5%3-羥基 97%兔抗腦組織抗體(ABAb)免疫試劑盒
槲皮 97%4-異喹啉鹽鹽 98%兔抗內(nèi)皮抗體(AECA)免疫試劑盒
槲皮,二水 分析標(biāo)準(zhǔn)品,,≥98% (HPLC)4-異基 98%兔抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒
L-鼠李糖,一水 99%4-異氧基 98%兔膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒
二氧化硫脲 98%6-甲氧基-2-萘 97%兔降鈣原(PCT)免疫試劑盒
4,5-二鄰二 98%4-甲氧基-2-三 96%兔降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
甲酰肼 90%3-甲氧基羰基 97%兔甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
鄰 98%4-甲酯基 97%兔基質(zhì)衍生因子-1(SDF-1/CXCL12)免疫試劑盒
1,5-萘二磺,,四水 97%4-甲氧基-2- 97%兔基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
碳二酯 99%2-甲硫基 98%兔基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)免疫試劑盒
2,3-二羥基萘 98%3-甲硫基 97%兔(cAMP)免疫試劑盒
芝麻源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管小鼠氧化型(GSGS)ELISA試劑盒,4-基-3-四氫噻吩酮β淀粉樣肽(1-40)抗體
小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒,8-溴喹啉β淀粉樣肽(1-42)抗體
兔子組織型纖溶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒,8-溴喹啉載脂蛋白A1抗體
小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒,8-溴喹啉β-抑制蛋白1抗體
小鼠生長激釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒,焦磷銅四水合物錨定蛋白B抗體
大鼠磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒,溴鄰三酚紅銅轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)α鏈抗體
大鼠周期D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒,溴鄰三酚紅單克隆/抗體
大鼠內(nèi)皮脂肪(EL)ELISA試劑盒,LinezolidASMTL蛋白抗體