詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | YS-01P6428 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,,分別測定熒光強度,,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,,下游引物不標(biāo)記,。在模板擴增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴增,。在PCR產(chǎn)物中,,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,,分別測定其熒光強度,,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c,、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,,最終酶使底物顯色,。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,也可實現(xiàn)定量檢測目的,。
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),,我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線,;
商定服務(wù)收費、付款方式,、服務(wù)期限等,,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),,本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),,可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計),。如果由您自己提供,,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針,。
我們進(jìn)行RNA抽提,、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄,、Real-time PCR擴增,、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,,包括實驗過程,、所用儀器試劑、擴增曲線,、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等,。
金屬鋰粒 99.9% metals basis2,3-二 98%兔血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
溴化鋰溶液 55 wt. % in H2O2,4-二 98%兔信號肽,CUB域,EGF樣1(SCUBE1)免疫試劑盒
甲芐酯 CP,98.0%2,5-二 97%兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒
甲 無水級, 99.8%2,5-二 98%兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒
2,5-二酚 Indicator3,4-二甲氧基 97%兔纖溶抑制因子(TAFI)免疫試劑盒
氫氧化鋇,一水 99%2,3-二吡啶-4- 95%兔纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒
化鋇,,二水 GR,99.5%2,4-二 97%兔色b-245重鏈(CYBB)免疫試劑盒
氫氧化鋇,,八水 AR,98%3-乙氧羰基 97%兔維甲受體應(yīng)答蛋白2(RARRES2)免疫試劑盒
氫氧化鋇,,八水 CP,,97%4-乙氧羰基 97%兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
氫氧化鋇,八水 ACS, 98% 對乙基 97%兔腎(Renin)免疫試劑盒
鎂 AR,99.5%2-乙氧基 98%兔腎上腺(EPI)免疫試劑盒
2,2-偶氮二異丁 98%3-乙氧基 98%兔神經(jīng)型乙酰受體亞基α7(CHRNA7)免疫試劑盒
對溴甲 99%5--2-甲氧基 97%兔神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒
對溴乙 98%5-甲基呋喃-2- 97%兔色上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒
碳鋇 ACS5-基-2-噻吩 97%兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒
杏仁源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管人基質(zhì)金屬蛋白組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒,TIMP-1 ELISA kit4-溴基乙載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體
人花生四烯(AA)ELISA試劑盒,AA ELISA4-溴-3,5-二羥基甲凋亡誘導(dǎo)因子3抗體
人一氧化氮合成(NOS)ELISA試劑盒,4-溴-3,5-二羥基甲凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體
人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒,4-溴-3,5-二羥基甲凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體
人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒,雙(2,4-二基)草酯(易)性神經(jīng)鞘磷脂抗體
人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA試劑盒,雙(2,4-二基)草酯(易)腺核轉(zhuǎn)運蛋白1抗體
人淋巴抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒,3,4-Methylenedioxyphenethylamine Hydrochloride肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體
人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒,2-環(huán)己酮甲乙酯ATPH+轉(zhuǎn)運溶體輔助蛋白2抗體
使用方法:
一,、樣品采集:
1,、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行,。
2,、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻,。
3,、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4,、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物,、粘液膿血送檢。
二,、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照,。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,,分別為 7,6,,5,,4,3,,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同),。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。