詳細介紹
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,,用戶只需要提供病毒樣品,。
2. 根據(jù)保守序列設計的專一性引物,,與相關病毒無交叉反應,。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應,。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR,。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,,有效期12個月,。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:霍亂弧菌核酸檢測試劑盒48T
貨號:YS-01P6328
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度,;3.反應時間,;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制,;6.PCR技術的基本原理,;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物,;9.PCR反應體系與反應條件,。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,,重現(xiàn)性為100%,。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,,可實現(xiàn)對其的直接檢測,,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時,。
5. 序列資源豐富,,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性,。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
實驗過程:
一,、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
三,、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室,。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響,。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,,純化的方法越簡單越好,。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套,。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,,試驗一下是否滿意,,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性,。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,,并且要充分混勻,。
5-溴-2-苯 97%甲 分析標準品,99.9%豬心型脂肪結合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)免疫試劑盒
5-溴-5-硝基-1,3-二惡烷 98%甲 電子級豬心鈉肽(ANP)免疫試劑盒
Nα-苯甲酰-DL-精氨酰-β-萘 97% 甲 ACS 光譜級, ≥99.9%豬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒
赫斯特熒光燃料,,33258 98%甲 LC-MS,,≥99.9%豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒
苯并[e]芘 分析標準品甲 色譜級+, ≥99.9%豬?;oA去飽和(SCD)免疫試劑盒
戊丁酯 ≥98.0 %甲 無酮,用于Romanowsky甲染色法豬纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)免疫試劑盒
3-溴基叔丁基二甲基硅 97%甲 蛋白測序級,,≥99.9%豬纖溶原激活物抑制因子(PAI)免疫試劑盒
抗氧劑618 試劑級甲 梯度色譜級, ≥99.9%豬色C氧化(COX)免疫試劑盒
1,,3-丁二烯溶液 20 wt. % in toluene甲 HPLC, ≥99.5%,用于制備豬色c還原(CCR)免疫試劑盒
硅鈣 分析標準品N-氨乙基哌 99%豬間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒
氯苯靈 分析標準品,99%二甘 98%豬間粘附分子2(ICAM-2)免疫試劑盒
氯苯靈 98%二乙烯三 Standard for GC,>99%(GC)豬戊糖(PE)免疫試劑盒
野百合 分析標準品二乙烯三 CP,97%豬瘟抗體免疫試劑盒
環(huán)戊烷 99%(GC)二乙烯三 97%豬瘟抗體(IgM)免疫試劑盒
4-氯-3-酚 99%二乙烯三 二乙烯三 99%豬瘟抗體(IgG)免疫試劑盒
霍亂弧菌核酸檢測試劑盒48T卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒--動物,,人DL-阿拉伯糖氨基糖類磷結構域蛋白抗體
卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒--動物,,人DL-阿拉伯糖唾液糖蛋白受體1抗體
氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒--動物,人DL-阿拉伯糖芳香基硫酯F抗體
神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒--動物,,人N-Acetyl-Val-Ala-Asp-alA激錨定蛋白5抗體
前列腺E2(PGE2)ELISA試劑盒--動物,,人4,4′-(六異亞基)二酚小腦脊髓共濟失調蛋白3抗體
小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒,4,4′-(六異亞基)二酚ASTE1蛋白抗體
小鼠葉(FA)ELISA試劑盒,4,4′-(六異亞基)二酚磷化自噬相關蛋白4B抗體
小鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒,4,4′-(六異亞基)二酚微絲相關蛋白1抗體