詳細(xì)介紹
ELISA 試驗(yàn)時(shí),,注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),,要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí),。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 ,。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:流行性腮腺炎病毒IgG抗體ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Mumps Virus IgG
檢測范圍:0~
貨號:YS-E98584
性狀:盒狀液體,。
實(shí)驗(yàn)方法:競爭法、一步法,、夾心法,、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究,。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個(gè)月,,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買,!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),,可分批次操作,,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,,用吸水紙吸干孔外試劑,;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,,防止交叉污染,。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時(shí)間的條件,;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時(shí),,拍板時(shí)要垂直,,避免交叉污染,用力不能過猛,,防止抗原抗體復(fù)合物脫離,;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出,;
③為了洗滌效果好,,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù),;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,;定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
優(yōu)點(diǎn):
1,、*抗體----高效、靈敏,、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,空白值低,,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強(qiáng)
4、購買本公司的ELISA試劑盒,,免費(fèi)代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,,高效
6,、適用于體液、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人,、猴,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、地鼠、兔,、豬,、犬,、牛、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹,、鱸魚、斑馬魚等
8,、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子,、血管生成素、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì),、實(shí)惠、可靠,,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,,科研隊(duì)伍,,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴。
NLE1NFKB激活蛋白抗體
Phospho-eNOS (Ser116)NLE1蛋白抗體
Phospho-eNOS (Ser615)磷酸化一氧化氮合成酶3(內(nèi)皮型)抗體
Phospho-eNOS (Ser632)磷酸化一氧化氮合成酶3(內(nèi)皮型)抗體
Orexin A磷酸化一氧化氮合成酶3(內(nèi)皮型)抗體
Orexin A增食欲素A/欲激素A抗體
OAS3增食欲素A/欲激素A抗體
OSR22'-5'-寡腺苷酸合成酶3抗體
Oct-4B(OCT4B-190)NT牙齒發(fā)育相關(guān)蛋白Osr2抗體
ORC1L胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白190抗體 (N端)
OTUB起始識別復(fù)合蛋白亞基1抗體
Oligophrenin 1泛素特異性蛋白酶Otubain2抗體
OGFOD2精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白Oligophrenin-1抗體
ORAV1末端多聚腺苷酸2蛋白抗體
ORP4口腔癌高表達(dá)的蛋白1抗體
流行性腮腺炎病毒IgG抗體ELISA檢測試劑盒桃金娘根 英文名稱:Downy Rosemyrtle root 規(guī)格:2g 保存:-20℃,,避光
五味子甲素 英文名稱:Cardamonin 規(guī)格:20mg 保存:-20℃,,避光
黃獨(dú)素B;黃獨(dú)乙素 英文名稱:Diosbulbin B B; Dioscorea bulbifera 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 保存:-20℃,,避光
阿佐塞米 英文名稱:Azor Sami 規(guī)格:50mg 保存:-20℃,,避光
SCG3 ProteinHuman重組人 SCG3 / Secretogranin 3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Antibiotic Agar No.2
CCL21 ProteinCynomolgus重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白
阪崎腸桿菌成套生化鑒定管11種*2套/盒*5盒用于阪崎桿菌的生化試驗(yàn)
扭肚藤 英文名稱:Torsion Jasmine 規(guī)格:1g 保存:-20℃,避光
REG1A ProteinHuman重組人 REG1A / PSPS 蛋白 (His 標(biāo)簽)
改良察氏體培養(yǎng)基250g用于霉菌的增菌培養(yǎng)
異黃芪皂苷II 英文名稱:Different astragalus saponin II 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支 保存:-20℃,,避光
復(fù)達(dá)欣3mg/支*5每支添加于 100ml HB4155中
氨芐西林系統(tǒng)適用性對照品 英文名稱:Ampicillin system suitability control products 規(guī)格:30mg 保存:-20℃,避光