實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,,用戶只需要提供病毒樣品,。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng),。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng),。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,,不能用于臨床診斷,。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月,。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:蠟樣芽胞桿菌核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管
貨號:YS-01P6366
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.2PCR管
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序,;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間,;4.循環(huán)次數(shù),;5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理,;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué),;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,,重現(xiàn)性為100%,。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,,可實現(xiàn)對其的直接檢測,,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時,。
5. 序列資源豐富,,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性,。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果,。
實驗過程:
一,、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
三,、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室,。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響,。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,,純化的方法越簡單越好,。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染,。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌,。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌,。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻,。
N-芐氧羰基乙二鹽鹽 98%印刷標(biāo)簽,小號, 25mm*100mm小鼠前列腺G/H合1(PTGS1)免疫試劑盒
高氯鋅,,六水 試劑級印刷標(biāo)簽,超小號,尺寸: 18mm*100mm小鼠前列腺F(PGF)免疫試劑盒
玉米核 97%21mm空白小標(biāo)簽 21mm小鼠前列腺E2合成(PGES)免疫試劑盒
N-α-芐氧羰基-L-2,4-二氨基丁 99%阿拉丁免檢小標(biāo)簽 125mm*32mm小鼠前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
酵母聚糖 A阿拉丁免檢大標(biāo)簽 160mm*60mm小鼠前列腺E1(PGE1)ELISA試劑盒
乙 >99.5%(GC)有發(fā)票此處開封 標(biāo)簽 140*20mm小鼠前列腺D2(PGD2)免疫試劑盒
乙 AR,99.0%內(nèi)有貨單此處開封 標(biāo)簽 140*20mm小鼠前列環(huán)(PGI2)免疫試劑盒
乙 99.5%易碎物品 標(biāo)簽 150*120mm小鼠前白蛋白(PA)免疫試劑盒
乙 99%L-乳鈣 USP級小鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)免疫試劑盒
乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)(-)-乳乙酯 98%小鼠葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒
2-乙酰基- 98%(-)-乳乙酯 99%小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)免疫試劑盒
乙酐 GR(易制品)(-)-乳乙酯 光致抗蝕劑級,99%小鼠葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒
反式 CP,97.00%L-乳 85-90%小鼠破傷風(fēng)(Tetanus)抗體免疫試劑盒
脫氫乙鈉 99%DL-乳 ACS, ≥85%小鼠破骨分化因子(ODF)免疫試劑盒
脫氫乙 98%L-乳鈉 AR,,60%水溶液小鼠蘋果脫氫(MDH)免疫試劑盒
蠟樣芽胞桿菌核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管大黃 Rhein六-2,4-戊二酮鋁載脂蛋白H抗體
膽固醇酯(豬胰)雙氯芬二磷腺核糖基轉(zhuǎn)移4抗體
人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒,雙氯芬AKIRIN2蛋白抗體
人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒,雙氯芬ADP核糖基化樣因子8B抗體
小鼠甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒,N-Boc-2,2′-(亞乙二氧基)二乙三磷腺家族蛋白2抗體
小鼠抗中性粒核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒,4-MorpholinecarbonitrileAKIRIN1蛋白抗體
小鼠蛋白激B(PKB)ELISA試劑盒,1-溴異喹啉錨定蛋白樣蛋白1抗體
小鼠血紅氧合2(HO-2)ELISA試劑盒,1-溴異喹啉腺激2抗體