詳細介紹
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品,。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,,與相關(guān)病毒無交叉反應,。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應,。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染,。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR,。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷,。
儲存條件:-20℃以下,,有效期12個月。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:水牛源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管
貨號:YS-01P6420
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.2PCR管
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序,;2.擴增溫度和延伸溫度,;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù),;5.PCR 反應液的配制,;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學,;8.PCR擴增產(chǎn)物,;9.PCR反應體系與反應條件。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,,特異性均達到100%,。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%,。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,,無需繁瑣的增菌過程,。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,,除公布的序列外,,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性,。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果,。
實驗過程:
一,、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,,而不能從無到有,,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計,。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二,、操作步驟
1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應,,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。
三,、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行,。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響,。一般而言,,只要能夠得到可靠的結(jié)果,,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染,。操作過程中均應戴手套,。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌,。
5.試劑都應該以大體積配制,,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性,。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌,。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,,并且要充分混勻。
亞甲基藍 Biological stainN,N,N',N'-四甲基-1,3-二 97%兔子基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒
亞甲基藍 超純級,Dye content, >90%(HPLC)納米氮化鋁 99.9% metals basis,50nm兔子基質(zhì)金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒
孔雀石綠 AR氮化鋁 N >33.0%,, D50/2.0 μm兔子基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒
鎂試劑Ⅰ 高純級,90%氮化鋁 N >32.5 % ,,D97/5.0 μm兔子基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒
鎂試劑Ⅰ AR納米鋇鐵氧體 30-50nm 球形 99.5%兔子肌鈣蛋白C(TnC)免疫試劑盒
鎂試劑Ⅱ AR納米鋇鐵氧體 200nm,99%兔子黃體生成(LH)免疫試劑盒
甲基紫 AR納米鉍粉 99.9% metals basis,40nm,球形兔子環(huán)磷鳥(cGMP)免疫試劑盒
甲基紫 IND(pH 0.1-2.0)三氧化二鉻 60nm 球形,98.0%兔子核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒
1-亞硝基-2-萘酚 96%納米鐵鈷 40nm 球形 99.5%兔子核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒
橙黃G BS納米碳粉 99.5%,,30nm兔子胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒
橙黃G AR,,≥80.0% (HPLC)四氧化三鈷 30nm 球形,99.5%兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫試劑盒
橙黃G AR,,≥80.0% (HPLC)氧化鏑 40nm 球形,,99.5%兔子骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒
橙黃G ≥96%(HPLC)石墨 99%,40nm兔子骨膠原交聯(lián)/Ⅰ型膠原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)免疫試劑盒
油紅O Biological stain納米羥基磷灰石 nanopowder,<100 nm particle size (BET), ≥97%兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)免疫試劑盒
橙黃Ⅳ Indicator納米四氧化三鐵 99.5%,20nm 球形兔子骨性磷(BALP)免疫試劑盒
水牛源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管人cAMP反應元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒,5--2-(易)腺環(huán)化4抗體
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒,4-氨基-嘧啶-5-腺活化蛋白激γ1抗體
小鼠戊糖(Pentosidine)ELISA試劑盒,4,6-二甲基-2-(易)芳香N-乙?;D(zhuǎn)移抗體
小鼠組織蛋白去乙?;?/span>HD)ELISA試劑盒,N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-D-色氨腺環(huán)化8抗體
小鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)ELISA試劑盒,N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-D-色氨腺環(huán)化10抗體
大鼠脂蛋白脂(LPL)ELISA試劑盒,3,4,5-三腺環(huán)化5抗體
大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒,3,4,5-三腺環(huán)化6抗體
大鼠膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒,β-糖腺環(huán)化9抗體