實驗外包:

1.基因組學：基因芯片、SNP檢測,、DNA甲基化檢測,、生物信息學分析

2.轉(zhuǎn)錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片,、表達譜芯片,、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學：2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot,、Co-ip  EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA

6.病理檢測：HE染色,、特殊染色、組織切片,、免疫組化,、流式細胞分選

7.代謝組學：GC-MS、LC-MS,、NMR

8.細胞及動物模型：原代細胞,、細胞模型、動物模型構(gòu)建

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2,、 標準品（凍干品）： 2瓶,，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,，蓋好后室溫靜置大約10分鐘,，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L,，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋）,，分別配制成200 U/L，100 U/L,，50 U/L，25 U/L,，12.5 U/L,，6.25 U/L，3.12 U/L,，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可,，其余濃度以此類推,。

3、 樣品稀釋液：1×20ml,。

4,、 檢測稀釋液A：1×10ml。

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注意事項：

1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,，各區(qū)實驗服、儀器,、耗材應獨立使用,，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置,。

2.為避免RNA降解,，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理,。

3.每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。

4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,，并應瞬時離心,。

5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放,。

6.為防止熒光干擾,，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記,。

7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置,；不同批號試劑不能混用。

8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None,。

9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

PCR實驗步驟：

①取凍存已裂解的細胞,，室溫放置5分鐘使其溶解,。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。

③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。

④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀,?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,，使其溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度,。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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