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基本信息：

產(chǎn)品名稱：乙醛脫氫酶（ALDH）紫外分光光度法

測試方法:紫外分光光度法

規(guī)格 : 50管/48樣

貨號：YS-01S6351

測定意義

乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,，廣泛存在于各種動物,、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸，在酒精代謝中起主要作用,。在人類和許多動物體內(nèi),，線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化,，所以在細(xì)胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注,；同時(shí)，乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測方面有較廣泛的研究應(yīng)用,。

測定原理

在輔酶Ⅰ存在的條件下,，乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH，在340nm處的吸光值會增加,，測定340nm處的吸光值變化,，可計(jì)算得到乙醛脫氫酶的活性。  

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平,、離心機(jī),、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì),、1mL石英比色皿,、蒸餾水。
用途范圍：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

需自配儀器：

1,、酶標(biāo)儀（比色測定波長為450nm）

2,、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、微量移液器

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一,、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg,，1克瓶裝，每瓶140,，000單位,，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml,，配成2800單位/ml,。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml,，血液不會凝固,。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些,?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后,，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml,。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中,，濕潤管壁,，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動,，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次,，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固,。

二,、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種,。同時(shí),，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿,。

1,、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存,。

2,、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后,，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存,。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑,。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽,、EDTA及枸櫞酸鈉。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①,、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,，充分抗凝,，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④,、抗凝收集的血漿冷凍保存后,，解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測定,。

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