詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
戈氏放線菌PCR檢測(cè)試劑盒 | Actinomyces gerencseriaePCR | 50次 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),,無(wú)非特異性擴(kuò)增,;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè),;
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒,。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
相關(guān)產(chǎn)品
馬節(jié)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒Arthrobacter equiPCR
節(jié)桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒Arthrobacter spp.PCR
黃曲霉PCR檢測(cè)試劑盒Aspergillus flavusPCR
赭曲霉PCR檢測(cè)試劑盒Aspergillus ochraceusPCR
寄生曲霉PCR檢測(cè)試劑盒Aspergillus parasiticusPCR
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,,而不能從無(wú)到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二,、操作步驟
1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行,。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室,。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,,只要能夠得到可靠的結(jié)果,,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染,。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套,。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌,。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性,。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌,。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),,并且要充分混勻。
公司正在出售的產(chǎn)品:
5-羥色胺受體4檢測(cè)試劑盒 HTR4 ELISA Kit5-Hydroxytryptamine Receptor 4(HTR4)ELISA Kit
5-羥色胺受體2A檢測(cè)試劑盒 HTR2A ELISA Kit5-Hydroxytryptamine Receptor 2A(HTR2A)ELISA Kit
5-羥色胺受體1A檢測(cè)試劑盒 HTR1A ELISA Kit5-Hydroxytryptamine Receptor 1A(HTR1A)ELISA Kit
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54kDa核孔蛋白檢測(cè)試劑盒 NUP54 ELISA KitNucleoporin 54kDa(NUP54)ELISA Kit
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5'-3'外切核糖核suanmei1檢測(cè)試劑盒 XRN1 ELISA Kit5'-3'Exoribonuclease 1(XRN1)ELISA Kit
4-羥基苯suan雙加氧mei檢測(cè)試劑盒 HPD ELISA Kit4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase(HPD)ELISA Kit
4-氨基丁suan轉(zhuǎn)氨mei檢測(cè)試劑盒 ABAT ELISA Kit4-Aminobutyrate Aminotransferase(ABAT)ELISA Kit
43kDaTarDNA結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒 TDP43 ELISA KitTar DNA Binding Protein 43kDa(TDP43)ELISA Kit
戈氏放線菌PCR檢測(cè)試劑盒Human Target Of The Aiproliferative Aibody 1(TAPA1)ELISA Kit人抗增生抗體靶分子1(TAPA1)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Ai-Apolipoprotein Aibodies(AAHA)ELISA Kit人抗載脂蛋白抗體(AAHA)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Transporter Associated With Aigen Processing(TAP)ELISA Kit人抗原提呈關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Aigen Peptide Transporter 1(TAP1)ELISA Kit人抗原肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAP1)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T