詳細介紹
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2,、 標準品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,100 U/L,,50 U/L,,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
產(chǎn)品名稱 | 蛤弧菌PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Vibrio tapetisPCR |
規(guī)格 | 50次 |
相關(guān)產(chǎn)品:
傷寒沙門菌和副傷寒沙門菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
豬鏈球菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
駱駝種特異性基因PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
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注意事項:
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,,各區(qū)實驗服,、儀器、耗材應獨立使用,,不能混用,;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進行操作,;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設(shè)置陰,、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心,。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),,并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,,應避免裸手直接接觸PCR反應管,,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置,;不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄,。
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,,使其溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度,。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片,、SNP檢測、DNA甲基化檢測,、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA,、CHIP,、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色,、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS,、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞,、細胞模型,、動物模型構(gòu)建
酪氨suan轉(zhuǎn)氨mei(TAT)活性蛋白英文名稱:Active Tyrosine Aminotransferase (TAT)物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
M2-型suan激mei(PKM2)活性蛋白英文名稱:Active Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)腫瘤免疫
組織蛋白meiA(CTSA)活性蛋白英文名稱:Active Cathepsin A (CTSA)物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)
脾臟酪氨suan激mei(SYK)活性蛋白英文名稱:Active Spleen Tyrosine Kinase (SYK)物種:Homo sapiens (Human,,人)
cGMP依賴性蛋白激meiⅡ(PRKG2)活性蛋白英文名稱:Active Protein Kinase, cGMP Depende Type II (PRKG2)物種:Homo sapiens (Human,人)
羧suan酯mei1(CES1)活性蛋白英文名稱:Active Carboxylesterase 1 (CES1)代謝通路
胞外超氧化物歧化mei(SOD3)活性蛋白英文名稱:Active Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
胞外超氧化物歧化mei(SOD3)活性蛋白英文名稱:Active Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)物種:Homo sapiens (Human,,人)
核糖核suanmeiP(RNASEP)活性蛋白英文名稱:Active Ribonuclease P (RNASEP)發(fā)育科學
胱天蛋白mei3(CASP3)活性蛋白英文名稱:Active Caspase 3 (CASP3)mei與激mei
蛤弧菌PCR檢測試劑盒水通道蛋白10(AQP10)ELISA試劑盒Human Aquaporin 10(AQP10)ELISA Kit
雙氧化mei2(DUOX2)ELISA試劑盒Human Dual Oxidase 2(DUOX2)ELISA Kit
雙氧化mei1(DUOX1)ELISA試劑盒Human Dual Oxidase 1(DUOX1)ELISA Kit
雙調(diào)蛋白B(AREGB)ELISA試劑盒Human Amphiregulin B(AREGB)ELISA Kit
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!